| 酶促重组等温扩增实时荧光法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用北大核心CSCD |
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| 作者姓名： | 胡海洋 应婉琴 何军 吕芷贤 谢小平 邓仲良 |
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| 作者单位： | 1.南华大学衡阳医学院公共卫生学院卫生检验与检疫系421001;2.南华大学衡阳医学院附属南华医院421001;3.南华大学衡阳医学院附属第一医院421001; |
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| 基金项目： | 湖南省研究生科研创新项目(QL20210232);湖南省大学生创新创业训练项目(S202010555230,S202110555123);湖南省教育厅科学研究项目(21A0261);湖南省卫生健康委科研重点课题(20201915);湖南省临床医疗技术创新引导项目(2020SK51901)。 |
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| 摘 要： | 利用酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术建立快速检测肺炎支原体的实时荧光检测方法。针对肺炎支原体P1基因设计特异性引物和探针,优化反应条件,分析其敏感性和特异性,并对临床样本进行验证。ERA实时荧光法在25-40℃均具有扩增能力,在35℃条件下对肺炎支原体的扩增效果最好,20 min内可完成扩增;该法对肺炎支原体的检出限为10^(3) copies/μL;并对其他6种呼吸道病原体进行检测,均无扩增曲线产生,有较好的特异性;以荧光定量PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法对34份临床样本的检测结果的诊断敏感度为96.15%、特异度为100%、阳性预测值为100%、阴性预测值为88.89%。本研究构建的ERA实时荧光法可以快速简单、灵敏和特异地检测出肺炎支原体,满足现场检测的需求。
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| 关 键 词： | 酶促重组等温扩增技术 实时荧光检测 肺炎支原体 |
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