人β2-微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达 |
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作者姓名: | 何贤辉 徐丽慧 刘毅 曾耀英 |
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作者单位: | 1.组织移植与免疫教育部重点实验室(暨南大学,广州 510632;2.暨南大学生物工程研究所,广州510632;3.郑州大学第一附属医院皮肤科,郑州450052 |
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摘 要: | β2-微球蛋白(β2m)是主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子的轻链部分, 为制备MHC-Ⅰ类分子四聚体的必要成分。 根据已报道的序列设计特异引物, 利用RT-PCR方法从人白细胞中克隆了β2m基因, 并构建了成熟β2m的原核表达载体, 在大肠杆菌中得到高效表达。 表达的β2m大部分在包涵体中,经洗涤、变性和复性,并以强阴离子交换柱层析纯化,获得SDS-PAGE纯的人重组β2m,Western印迹法分析表明该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性。此工作为制备MHC-Ⅰ类分子四聚体奠定基础。
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关 键 词: | β2-微球蛋白, 基因克隆, 重组蛋白, 包涵体 |
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