一种新的人泛肽交联酶的cDNA的克隆

ｐ５３可以同细胞内的许多种蛋白质形成复合物从而参与细胞周期调节、基因表达调控、细胞分化、细胞程序化死亡和抑制肿瘤的发生等各项生理过程。为了筛选与ｐ５３作用的蛋白质因子，利用酵母双杂交（ｔｗｏ－ｈｙｂｒｉｄ）系统，筛选了ＨｅＬａ细胞的ｃＤＮＡ文库。在１．５×１０６个转化子中筛选到６个阳性克隆。经ＤＮＡ全序列分析，结果表明５个阳性克隆中的ｃＤＮＡ序列编码产物均由１５８个氨基酸构成，分子量为１７ｋＤ的人泛肽交联酶。同源性比较表明，该泛肽交联酶与人的ＵＢＣ９（９７％）、线虫的ＵＢＣ（７６％）、裂殖酵母的ＨＵＳ５（６６％）、拟南芥菜的ＵＢＣ（６６％）和啤酒酵母的ＵＢＣ９（５６％）有较高的同源性。进行了１６种正常人组织和７种肿瘤细胞株的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，结果显示：它在心脏、胎盘、胸腺、睾丸、卵巢、结肠和外周血白细胞中的表达较在肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、前列腺和小肠中为高，而在脑和肺中则检测不到表达。它在宫颈癌细胞株、乳腺癌细胞株、淋巴瘤细胞株和畸胎瘤细胞株中的表达较高，而在肺癌细胞株、肝癌细胞株和神经胶质瘤细胞株中则无明显表达。