拟南芥AtNHX2启动子的克隆及表达模式分析 |
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引用本文: | 李金耀,徐莉,马纪,周洁,张富春. 拟南芥AtNHX2启动子的克隆及表达模式分析[J]. 生物化学与生物物理进展, 2004, 31(12) |
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作者姓名: | 李金耀 徐莉 马纪 周洁 张富春 |
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摘 要: | AtNHX2基因是拟南芥NHX基因家族的一员,编码了一种液泡膜中的Na+/H+反向运输体并对拟南芥的耐盐能力起着重要的作用.采用PCR扩增的方法克隆了拟南芥AtNHX2基因启始密码子上游约2.8kb的DNA片段,并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA1301-1中,通过基因枪轰击洋葱表皮瞬时表达的方法,初步检测启动子的活性.将重组质粒pCAMBIA1301-1/AtNHX2 promoter转化拟南芥并筛选纯合子.AtNHX2 promoter-GUS分析显示AtNHX2在所有的组织中均有表达,包括根尖.在保卫细胞中检测到了强烈的GUS表达,这一结果表明,AtNHX2对特殊细胞的pH调控和K+自身稳定方面起着重要的作用.AtNHX2启动子的活性可被NaCl抑制,并且抑制的强度和NaCl的浓度成正相关.300 mmol/L KCl处理可增强启动子的活性,说明NaCl和KCl是在转录水平上调控AtNHX2的表达.在老叶中GUS活性比在新叶中GUS活性强,这说明了AtNHX2优先将有毒的离子积累在老叶中,从而有利于植物的正常发育.在根毛细胞中也观测到了强烈的GUS活性,这就暗示了AtNHX2在扩大的液泡中储存Na+.
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关 键 词: | AtNHX2启动子 瞬时表达 表达模式分析 盐胁迫 |
Molecular Cloning and Expression Analysis of AtNHX2 Promoter |
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Abstract: | |
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Keywords: | AtNHX2 promoter transient expression expression analysis salt stress |
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