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产胶原酶菌株的筛选鉴定、发酵优化及胶原酶纯化
引用本文:李星硕,朱玥明,管于平,柏玮,贾士儒,孙媛霞.产胶原酶菌株的筛选鉴定、发酵优化及胶原酶纯化[J].微生物学报,2016,56(6):1034-1043.
作者姓名:李星硕  朱玥明  管于平  柏玮  贾士儒  孙媛霞
作者单位:天津科技大学生物工程学院, 天津 300457;中国科学院天津工业生物技术研究所, 天津 300308,中国科学院天津工业生物技术研究所, 天津 300308,中国科学院天津工业生物技术研究所, 天津 300308,中国科学院天津工业生物技术研究所, 天津 300308,天津科技大学生物工程学院, 天津 300457,中国科学院天津工业生物技术研究所, 天津 300308
基金项目:国家“863计划”(2013AA102105);天津市科技支撑计划重点项目(132C2DSY05600)
摘    要:【目的】从肉联厂附近土壤中筛选出新型的胶原酶菌种,并通过提高其产酶量后研究其胶原酶的纯化方法,进一步研究该胶原酶对胶原蛋白的降解效率。【方法】经形态特征、生理生化特征以及16S rRNA基因进化树分析鉴定该菌株,并对该菌株产酶发酵条件进行优化,最终利用强阴离子交换树脂对该菌株所产的胶原酶进行分离纯化。【结果】该菌株鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。对该菌株的产酶发酵条件进行优化,结果表明最适碳源为2.0%葡萄糖、最适氮源为1.5%胰蛋白胨、最适无机盐为0.005%Ca~(2+);初始发酵液pH 7.5、发酵温度37℃,在最适条件下,该菌株发酵液的酶活为(65.81±2.06)U/m L,相比优化前(26.7±1.9)U/m L,酶活提高约1.5倍。对该菌株所产的胶原酶进行分离纯化,得到1个分子量约为100 k Da、纯度大于90%的胶原酶,其比酶活力约为(7615.0±78.7)U/mg。【结论】该研究所发现的胶原酶酶活较高,能够使胶原蛋白在短时间内被有效地降解为具有生物活性的胶原短肽,在食品、医疗、保健品、化妆品等领域具有较广泛的应用前景。

关 键 词:胶原蛋白酶  蜡样芽孢杆菌  筛选  纯化  发酵优化
收稿时间:2015/10/10 0:00:00
修稿时间:2015/12/3 0:00:00

Screening, identification and fermentation optimization of a collagenase-producing strain and purification of the collagenase
Xingshuo Li,Yueming Zhu,Yuping Guan,Wei Bai,Shiru Jia and Yuanxia Sun.Screening, identification and fermentation optimization of a collagenase-producing strain and purification of the collagenase[J].Acta Microbiologica Sinica,2016,56(6):1034-1043.
Authors:Xingshuo Li  Yueming Zhu  Yuping Guan  Wei Bai  Shiru Jia and Yuanxia Sun
Institution:College of Biotechnology, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China;National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Tianjin 300308, China,National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Tianjin 300308, China,National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Tianjin 300308, China,National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Tianjin 300308, China,College of Biotechnology, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China and National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Tianjin 300308, China
Abstract:
Keywords:collagenase  Bacillus cereus  screening  purification  fermentation optimization
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