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枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达
引用本文:马威,沈志娜,陈轶群,李志民,曹云鹤.枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达[J].生物技术通讯,2010,21(2):171-174.
作者姓名:马威  沈志娜  陈轶群  李志民  曹云鹤
作者单位:1. 中国农业大学,动物营养学国家重点实验室,北京,100193
2. 哈尔滨师范大学,生命科学院,黑龙江,哈尔滨,150025
基金项目:国家高技术研究发展计划,教育部新世纪优秀人才支持计划,动物营养学国家重点实验室自主研究课题(2004DA125184 
摘    要:目的:研制高效分泌表达枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌株。方法与结果:将优化设计的枯草芽孢杆菌MA139β-甘露聚糖酶基因用EcoRⅠ/XbaⅠ双酶切,克隆到诱导型表达载体pPICzαA中α因子信号肽编码序列的下游,转化大肠杆菌筛选重组质粒,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,经Zeocin筛选,获得重组表达菌株X-33/mann。将重组菌株在10L全自动发酵罐中进行高密度发酵培养,甲醇诱导72h发酵活力达到2100U/mL。重组甘露聚糖酶的最适催化温度为40℃,最适催化pH值为6.0。结论:枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中获得了高效分泌表达,具有开发作为饲料添加剂的潜能。

关 键 词:β-甘露聚糖酶  枯草芽孢杆菌  毕赤酵母  分泌表达
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