大豆查尔酮还原酶基因CHR1的功能研究 |
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引用本文: | 吴楠,王丕武,李丹,代力强,郑成忠,卢实,才源,张卓,曲静,夏海丰. 大豆查尔酮还原酶基因CHR1的功能研究[J]. 遗传, 2014, 36(7): 707-712. DOI: 10.3724/SP.J.1005.2014.0707 |
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作者姓名: | 吴楠 王丕武 李丹 代力强 郑成忠 卢实 才源 张卓 曲静 夏海丰 |
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作者单位: | 1. 吉林农业大学农学院, 长春 130118; 2. 通化市农业科学研究院, 梅河口 135000 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(编号:31171568)资助 |
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摘 要: | 为了验证查尔酮还原酶基因CHR1在大豆苷元合成中的作用, 文章克隆了CHR1基因并构建了RNA干扰表达载体pCPB-CHR1-RNAi, 将载体转化受体大豆品种“吉农28”中, 以期抑制CHR1基因的转录。通过农杆菌介导的遗传转化和PCR检测得到4株T0 代阳性植株, 13株T1代阳性植株。Southern blotting结果表明, 功能元件以单拷贝的形式整合到大豆的基因组中。利用实时荧光定量PCR法(Quantitative real-time PCR, qRT-PCR)测定CHR1基因在mRNA水平上的表达量, 结果表明, 转基因大豆植株中CHR1的表达量与未转化的受体大豆相比降低了60%~99%; 高效液相色谱法(High performance liquid chromatography, HPLC)检测到合成大豆苷元过程中的前体物质异甘草素的含量降低了38.7%。该RNA干扰机制在转录水平上抑制了CHR1基因的表达。
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关 键 词: | 大豆 查尔酮还原酶CHR1 大豆苷元 RNA干扰载体 |
收稿时间: | 2014-01-07 |
Function of chalcone reductase gene CHR1 in soybean |
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Affiliation: | 1. College of Agriculture, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China; 2. Tonghua Academy of Agricultural Sciences, Meihekou, Jilin 135000, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | soybean chalcone reductase CHR1 daidzein RNA interference vector |
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