| 辣椒疫霉PcCRN20-C蛋白的表达纯化及结晶 * |
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| 引用本文： | 朱彤彤,杨磊,刘应保,孙文秀,张修国. 辣椒疫霉PcCRN20-C蛋白的表达纯化及结晶 *[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(1-2): 116-123. DOI: 10.13523/j.cb.1906036 |
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| 作者姓名： | 朱彤彤 杨磊 刘应保 孙文秀 张修国 |
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| 作者单位： | 1 长江大学生命科学学院 荆州 4340002 山东农业大学植物保护学院 泰安 271018 |
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| 基金项目： | * 国家自然科学基金(31701573);湖北省教育厅科学研究计划重点项目(D20181302) |
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| 摘 要： | CRN(crinkling and necrosis-inducing protein)为疫霉菌在与寄主互作过程中分泌的一类特有胞质效应因子,干扰寄主细胞正常的生理代谢和功能。采用PCR法从辣椒疫霉LT1534菌株cDNA中克隆PcCRN20-C基因。该基因序列长783bp,编码261个氨基酸。构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。在优化条件下诱导表达重组蛋白,利用Ni-NTA金属螯合层析、离子交换层析、分子筛层析和胰蛋白酶酶解技术获得高纯目的蛋白,SDS-PAGE分析表明,蛋白质分子量约为25kDa。采用座滴气相扩散法进行晶体制备和筛选,成功获得了蛋白质晶体,并通过X-射线衍射仪收集了晶体衍射花样。结合蛋白质晶体学方法,获得了有衍射的辣椒疫霉PcCRN20-C蛋白晶体,为进一步研究CRN蛋白的结构与病原菌致病机制提供参考资料。
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| 关 键 词： | 辣椒疫霉 皱缩坏死蛋白 蛋白质纯化结晶 X-射线衍射 |
| 收稿时间： | 2019-06-26 |
Purification and Crystallization of PcCRN20-C from Phytophthora capsici |
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| ZHU Tong-tong,YANG Lei,LIU Ying-bao,SUN Wen-xiu,ZHANG Xiu-guo. Purification and Crystallization of PcCRN20-C from Phytophthora capsici[J]. China Biotechnology, 2020, 40(1-2): 116-123. DOI: 10.13523/j.cb.1906036 |
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| Authors: | ZHU Tong-tong YANG Lei LIU Ying-bao SUN Wen-xiu ZHANG Xiu-guo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Phytophthora capsici Crinkling and necrosis-inducing protein Purification crystallization X-ray diffraction |
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