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MiR-186-5p对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响研究 *
引用本文:辜浩,郭鑫宇,堵晶晶,张锫文,王定国,廖坤,张顺华,朱砺. MiR-186-5p对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响研究 *[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(3): 21-30. DOI: 10.13523/j.cb.1907035
作者姓名:辜浩  郭鑫宇  堵晶晶  张锫文  王定国  廖坤  张顺华  朱砺
作者单位:1 四川农业大学动物科技学院 成都 6111302 四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室3 成都市动物疫病预防控制中心 成都 6100414 四川省通江县农业局畜牧站 巴中 636600
基金项目:* 国家重点研发计划项目(2018YFD0501004);四川省科技支撑项目(2016NZ0050);国家现代农业产业技术体系四川生猪创新团队项目(SCCXTD-008)
摘    要:目的 探究miR-186-5p对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖,分化的影响及其潜在的分子机制.方法: qRT-PCR检测miR-186-5p在不同周龄小鼠白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞增殖分化过程中的表达变化;通过脂质体将miR-186-5p mimics,inhibitors转染入增殖液或分化液培养的3T3-L1细胞后,利用CCK-8,EdU和qRT-PCR检测3T3-L1前脂肪细胞增殖变化,油红O染色观察其脂滴形态;通过生物信息软件TargetScan和双荧光报告系统分别对miR-186-5p靶基因进行预测和确认.结果: (1)miR-186-5p在1~6周龄小鼠的白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞自然分化过程中表达量均逐渐上调.(2)与阴性对照相比,mimics或inhibitors转染分别显著地促进或抑制了miR-186-5p的表达.(3)过表达miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞的增殖速率减慢,脂滴增大增多;而抑制miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞增殖速率增快,脂滴数量减少,且粒径变小.其中过表达miR-186-5p显著地降低了野生型Wnt5aMapk1 3'-UTR活性,而突变相应的绑定位点可解除该抑制作用.结论: miR-186-5p可抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,且通过直接靶向Wnt5aMapk1以促进其分化为成熟脂肪细胞.

关 键 词:3T3-L1前脂肪细胞  miR-186-5p  分化  增殖  Wnt5a  Mapk1  
收稿时间:2019-07-17

The Effect of miR-186-5p on the Proliferation and Differentiation of 3T3-L1 Preadipocyte
GU Hao,GUO Xin-yu,DU Jing-jing,ZHANG Pei-wen,WANG Ding-guo,LIAO Kun,ZHANG Shun-hua,ZHU Li. The Effect of miR-186-5p on the Proliferation and Differentiation of 3T3-L1 Preadipocyte[J]. China Biotechnology, 2020, 40(3): 21-30. DOI: 10.13523/j.cb.1907035
Authors:GU Hao  GUO Xin-yu  DU Jing-jing  ZHANG Pei-wen  WANG Ding-guo  LIAO Kun  ZHANG Shun-hua  ZHU Li
Abstract:
Keywords:3T3-L1 preadipocyte  miR-186-5p  Differentiation  Proliferation  Wnt5a  Mapk1  
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