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聚乙二醇二缩水甘油醚交联氨基载体LX-1000EA固定化脂肪酶 *
引用本文:朱衡,张继福,张云,孙爱君,胡云峰. 聚乙二醇二缩水甘油醚交联氨基载体LX-1000EA固定化脂肪酶 *[J]. 中国生物工程杂志, 2020, 40(1-2): 124-132. DOI: 10.13523/j.cb.1904041
作者姓名:朱衡  张继福  张云  孙爱君  胡云峰
作者单位:1 中国科学院南海海洋研究所 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广州 5103012 中国科学院大学 北京 1000493 广东省中医院 广州 510120
基金项目:* 广东省海洋渔业科技攻关与研发方向项目(A201701C12);中国科学院战略性先导科技专项(XDA11030404);中国科学院“科学”号高端用户项目(KEXUE2018G05);广东省自然科学基金(2018A030313151)
摘    要:聚乙二醇二缩水甘油醚(PEGDGE)作为双功能环氧试剂,在实验中被用于交联氨基载体LX-1000EA共价固定化海洋脂肪酶,经过处理后的载体共价固定化脂肪酶具有良好的效果。实验经过单因素初筛和正交试验,得到最佳的交联及固定化条件为0.75%交联剂浓度、交联温度35℃、交联时间3h、载体量1.25g、pH9.0、固定化温度55℃、固定化时间1h。对LX-1000EA-PEGDGE固定化酶与游离酶、戊二醛(GA)交联LX-1000HA-GA的固定化酶进行酶学性质的比较,发现LX-1000EA- PEGDGE固定化酶较游离酶最适反应温度未改变,与LX-1000HA-GA相同的是最适反应pH都由7.0提高为8.0。在最适条件中所测LX-1000EA-PEGDGE酶活达到78.84U/g,固定化改变了游离酶的酸碱耐受性,热稳定性和操作稳定性较游离酶和LX-1000HA-GA固定化酶均有提高。LX-1000EA-PEGDGE的热稳定表现优异,在60℃孵育3h后保留90%酶活;使用5次后仍能残余50%酶活;保存30天酶活仍保留60%。首次使用新型双环氧交联剂PEGDGE交联有机氨基载体共价结合固定化脂肪酶,为更有效的固定化方法提供了技术支持,同时也发现交联剂对固定化酶的性质存在较大影响。

关 键 词:聚乙二醇缩水甘油醚  氨基载体LX-1000EA  脂肪酶  固定化  酶学性质  
收稿时间:2019-04-19

Immobilization of Lipase Through Cross-linking of Polyethylene Glycol Diglycidyl Ether with Amino Carrier LX-1000EA
ZHU Heng,ZHANG Ji-fu,ZHANG Yun,SUN Ai-jun,HU Yun-feng. Immobilization of Lipase Through Cross-linking of Polyethylene Glycol Diglycidyl Ether with Amino Carrier LX-1000EA[J]. China Biotechnology, 2020, 40(1-2): 124-132. DOI: 10.13523/j.cb.1904041
Authors:ZHU Heng  ZHANG Ji-fu  ZHANG Yun  SUN Ai-jun  HU Yun-feng
Abstract:
Keywords:Polyethylene glycol diglycidyl ether  Amino-carrier LX-1000EA  Lipase  Immobilization  Enzymatic property  
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