| 构建一种检测水中As3+的敏感型大肠杆菌 |
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| 引用本文： | 王伍,纪松军,黄招竹,卢彬彬,吕建新.构建一种检测水中As3+的敏感型大肠杆菌[J].生物工程学报,2016,32(8):1081-1092. |
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| 作者姓名： | 王伍 纪松军 黄招竹 卢彬彬 吕建新 |
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| 作者单位： | 温州医科大学 检验医学院 生命科学学院 浙江省模式生物技术与应用重点实验室，浙江 温州 325000,温州医科大学 检验医学院 生命科学学院 浙江省模式生物技术与应用重点实验室，浙江 温州 325000,温州医科大学 检验医学院 生命科学学院 浙江省模式生物技术与应用重点实验室，浙江 温州 325000,温州医科大学 检验医学院 生命科学学院 浙江省模式生物技术与应用重点实验室，浙江 温州 325000,温州医科大学 检验医学院 生命科学学院 浙江省模式生物技术与应用重点实验室，浙江 温州 325000 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2014AA06A514)，浙江省公益技术研究项目 (No. 2016C33027) 资助。 |
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| 摘 要： | 为构建一种敏感性强、特异性好的检测砷离子的大肠杆菌荧光报告菌株,本研究利用基因敲除技术,敲除了大肠杆菌中负责向胞外转运砷离子的ars B基因,构建对As~(3+)敏感的菌株;利用egfp基因作为报告基因,构建融合检测载体p ET28b-Pars-ars R-egfp。然后将检测载体p ET28b-Pars-ars R-egfp转化至ars B基因敲除菌中完成敏感型As~(3+)检测菌株的构建。接着对此微生物传感器进行了检测条件的优化,以及线性检测范围、最低检出限、特异性等性能的确定。研究结果表明,与利用野生大肠杆菌作为检测宿主相比,此敏感型砷检测菌株对检测As~(3+)的灵敏度有显著提高,最适检测As~(3+)浓度范围为0.013-42.71μmol/L,最低检出下限为5.13 nmol/L。因此,本研究利用基因敲除技术对大肠杆菌进行改造,成功地提高了砷检测微生物传感器的灵敏度,为重金属微生物传感器的优化研究工作提供了有用方案。
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| 关 键 词： | As3+检测，大肠杆菌，arsB基因，基因敲除，敏感性 |
| 收稿时间： | 1/7/2016 12:00:00 AM |
Construction of an Escherichia coli strain for sensitive detection of arsenite ion in water |
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| Institution: | Zhejiang Provincial Key Laboratory for Technology and Application of Model Organisms, School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, Zhejiang, China,Zhejiang Provincial Key Laboratory for Technology and Application of Model Organisms, School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, Zhejiang, China,Zhejiang Provincial Key Laboratory for Technology and Application of Model Organisms, School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, Zhejiang, China,Zhejiang Provincial Key Laboratory for Technology and Application of Model Organisms, School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, Zhejiang, China and Zhejiang Provincial Key Laboratory for Technology and Application of Model Organisms, School of Laboratory Medicine and Life Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, Zhejiang, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | arsenite ion detection Escherichia coli arsB gene gene knock-out sensitivity |
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