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观赏羽衣甘蓝BoDFR基因的克隆及表达分析
引用本文:王玉书,杨旭妍,付 震,夏 爽,段钰萌,罗大森,曹 蕾.观赏羽衣甘蓝BoDFR基因的克隆及表达分析[J].西北植物学报,2020,40(9):1483-1489.
作者姓名:王玉书  杨旭妍  付 震  夏 爽  段钰萌  罗大森  曹 蕾
作者单位:(1 齐齐哈尔大学 生命科学与农林学院,黑龙江齐齐哈尔 161006;2 黑龙江省抗性基因工程与寒地生物多样性保护重点实验室,黑龙江齐齐哈尔 161006;3 鞍山市检验检测认证中心,辽宁鞍山 114000)
基金项目:国家自然科学基金(31401908);
摘    要:为揭示羽衣甘蓝二氢黄酮醇4 还原酶 (DFR)基因调控花青素合成的功能,该研究对不同叶色羽衣甘蓝的叶片花青素含量进行测定,根据结球甘蓝DFR序列信息,利用 RT PCR 技术克隆羽衣甘蓝BoDFR基因并进行实时荧光定量表达分析。结果表明: BoDFR的cDNA全长为1 158 bp,编码385个氨基酸,其蛋白相对分子质量为42 925.06 Da,预测亚细胞定位为细胞质;蛋白质二级结构分析表明α 螺旋和无规则卷曲为DFR 蛋白的主要二级结构元件。序列比对显示 DFR 蛋白具有 NADPH 结合位点和底物结合位点,属于NADB Rossmann 超基因家族。系统进化分析表明,BoDFR与结球甘蓝(Brassica oleracea var. capitata)DFR亲缘关系最近。花青素含量测定显示,紫叶羽衣甘蓝叶片中花青素含量最高,粉叶羽衣甘蓝含量较高,而白叶羽衣甘蓝叶片中检测不到花青素。实时荧光定量 PCR 分析表明,BoDFR基因表达量与花青素含量高低一致,其中紫叶羽衣甘蓝叶片中BoDFR基因的表达量最高,而白叶羽衣甘蓝心叶中仅微量表达。

关 键 词:羽衣甘蓝  花青素  二氢黄酮醇  4  还原酶(DFR)基因  基因克隆  基因表达

Cloning and Expression Analysis of DFR in Ornamental Kale (Brassica oleracea L. var. acephala)
WANG Yushu,YANG Xuyan,FU Zhen,XIA Shuang,DUAN Yumeng,LUO Dasen,CAO Lei.Cloning and Expression Analysis of DFR in Ornamental Kale (Brassica oleracea L. var. acephala)[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2020,40(9):1483-1489.
Authors:WANG Yushu  YANG Xuyan  FU Zhen  XIA Shuang  DUAN Yumeng  LUO Dasen  CAO Lei
Abstract:
Keywords:kale  anthocyanin  dihydroflavonol 4 reductase(DFR) gene  gene cloning  gene expression
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