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绿色荧光蛋白在α-1,3半乳糖基转移酶敲除猪组织器官的表达分析
引用本文:李智方,冯冲,纪慧丽,石宁宁,宋小凤,赵勤丽,龙川,潘登科,杨小淦. 绿色荧光蛋白在α-1,3半乳糖基转移酶敲除猪组织器官的表达分析[J]. 遗传, 2015, 37(12): 1211-1217. DOI: 10.16288/j.yczz.15-160
作者姓名:李智方  冯冲  纪慧丽  石宁宁  宋小凤  赵勤丽  龙川  潘登科  杨小淦
作者单位:1. 广西大学,亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁 530004;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室,北京 100193
基金项目:亚热带农业生物资源保护利用国家重点实验室开放课题(编号:SKL201404)和国家高技术研究发展计划(863计划)项目(编号:2012AA020601)资助
摘    要:猪是人类异种器官移植的理想供体,然而猪-人的异种器官移植会产生剧烈的排斥反应。虽然已制备的α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(Galactosyltransferase gene knockout, GTKO)猪可有效缓解猪-人异种器官移植引起的超急性免疫排斥,但缺少报告基因直观示踪移植后的细胞迁移及器官排斥状态。本文将CAG启动子驱动增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein, EGFP)的表达载体导入GTKO猪耳成纤维细胞,通过体细胞核移植技术制备了EGFP猪。利用双荧光蛋白观测镜、荧光显微镜及定量PCR扩增观察、检测和分析克隆猪各组织器官中EGFP蛋白和转录本的表达状况。结果显示,EGFP蛋白及转录本在克隆猪各组织器官中均有表达,但在肝脏和中枢神经系统中表达较弱。本文成功获得了各组织器官表达EGFP的GTKO猪,为EGFP示踪异种细胞组织移植奠定了基础。

关 键 词:GTKO  增强型绿色荧光蛋白    异种移植  
收稿时间:2015-04-15

Expression analysis of green fluorescent protein in tissues and organs in α-1,3 galactosyltransferase knockout pigs
Affiliation:1. State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University, Nanning 530004,China;2. Key Laboratory of Farm Animal Genetic Resource and Germplasm Innovation of Ministry of Agriculture, Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:GTKO  EGFP  pig  xenotransplation  
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