靶向调控血管生成素miRNA的筛选和验证

血管生成素是一个重要的促血管生成因子，在细胞增殖、迁移和凋亡等过程中均发挥重要作用，但其具体的分子机制尚待阐明.miRNA是一类长约22 nt的小RNA，在转录后水平调控基因的表达，广泛参与各种生物学过程.本文探索了可直接调控血管生成素表达的miRNA，希望为阐明血管生成素的作用机制提供线索.首先，我们利用数据库预测得到8个可能靶向结合血管生成素mRNA 3′端非编码区的miRNA；然后，用实验方法验证它们与血管生成素的靶向关系，发现miR-1208、miR-196b、miR-296、miR-409-3p、miR-570和miR-641这6个miRNA可以不同程度地抑制血管生成素的mRNA和蛋白质表达水平，但只有miR-196b、miR-296、miR-409-3p和miR-641可以直接结合血管生成素mRNA的3′端非编码区；进而，在血管内皮细胞中分别过表达这4个miRNA，发现miR-196b、miR-409-3p和miR-641可以抑制血管内皮细胞的细胞增殖，而miR-196b、miR-296和miR-409-3p可以抑制血管内皮细胞的管腔形成.以上结果表明，细胞内有多个miRNA调控血管生成素的表达，它们可能协调调节血管生成，抑或在血管生成的不同阶段发挥作用.我们的工作还为“一种mRNA可被多种microRNA调节，而一种microRNA可调节多种mRNA”假说提供了部分证据.

Screening and Functional Analysis of Angiogenin targeting miRNAs