| 猪轮状病毒vp4基因在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 宋岩 李一经 魏丽丽 于小龙 樊琛 师东方. 猪轮状病毒vp4基因在大肠杆菌中的表达[J]. Virologica Sinica, 2004, 19(5): 462-466 |
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| 作者姓名： | 宋岩 李一经 魏丽丽 于小龙 樊琛 师东方 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动医学院病原分子生物学实验室 黑龙江哈尔滨150030(宋岩，李一经，魏丽丽，于小龙，樊琛)，东北农业大学动医学院病原分子生物学实验室 黑龙江哈尔滨150030(师东方) |
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| 基金项目： | 黑龙江省十五攻关课题(GC01B510) |
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| 摘 要： | 以猪轮状病毒JL94株核酸为模板扩增该病毒vp4全基因，对扩增产物进行测序及序列比较；根据VP4的5’端(1bp-750bp)特异片段主要决定其活性的观点，再设计一对引物扩增该主要抗原位点基因，将此主要抗原位点基因同pGEX-6P-1载体连接并转化入E．coli．BL2l(DE3)plays，经IPTG诱导表达出蛋白质；对表达的蛋白进行Westernblot分析、纯化和血清中和抗体试验。结果表明：JL94株与国外分离株CRW．8株、BEN．307株vp4全基因片段氨基酸同源性分别为96．98％和98．05％，说明JL94株与CRW．8株、BEN．307株属于同-vP4血清型；经IPTG诱导VP4主要抗原位点基因获得了高效表达，表达量占菌体蛋白的26％；Westernblot结果和所表达的融合蛋白免疫小鼠产生的中和抗体能阻断JL94在MAl04细胞上引起的细胞病变，说明所表达蛋白有良好的生物学活性。
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| 关 键 词： | 猪轮状病毒 vp4基因 VP4主要抗原位点基因 原核表达 |
Expression of vp4 Gene from Porcine Rotavirus in E. coli |
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| SONG Yan,LI Yi-jing,WEI Li-li,YU Xiao-long,FAN Chen,SHI Dong-fang. Expression of vp4 Gene from Porcine Rotavirus in E. coli[J]. 中国病毒学(英文版), 2004, 19(5): 462-466 |
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| Authors: | SONG Yan LI Yi-jing WEI Li-li YU Xiao-long FAN Chen SHI Dong-fang |
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| Affiliation: | SONG Yan,LI Yi-jing**,WEI Li-li,YU Xiao-long,FAN Chen,SHI Dong-fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Porcine rotavirus(PRV) vp4 gene Major antigen site Prokaryotic expression |
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