| 基于BAC重组酶系统构建莱航鸡多位点基因打靶载体的研究 |
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| 引用本文： | 唐冬生,李芳,蒋泓,胡大林,张细权,李月琴,周天鸿.基于BAC重组酶系统构建莱航鸡多位点基因打靶载体的研究[J].微生物学报,2007,23(2). |
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| 作者姓名： | 唐冬生 李芳 蒋泓 胡大林 张细权 李月琴 周天鸿 |
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| 作者单位： | 佛山大学，佛山 528000;暨南大学生命科学与技术学院，广州 510632;佛山大学，佛山 528000;佛山大学，佛山 528000;佛山大学，佛山 528000;华南农业大学动物科学学院，广州 510642;暨南大学生命科学与技术学院，广州 510632;暨南大学生命科学与技术学院，广州 510632 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（No.30470978, 30671194）和广东省自然科学基金资助项目（No.04011645）. |
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| 摘 要： | 以莱航鸡重复的rDNA 基因间的间隔序列为靶位点，利用BAC重组酶系统构建含人干扰素基因的多位点基因打靶载体，为建立莱航鸡多位点基因打靶技术获得关键材料。首先构建BAC-TDN筛选载体，然后构建pYLVS-GID表达载体。将BAC-TDN筛选载体和pYLVS-GID表达载体共转化至大肠杆菌NS3529中，通过其Cre重组酶的作用形成BAC-TDN-VS-GID质粒，采用归位内切酶I-SceⅠ切除pYLVS质粒骨架，利用接头LS使之环化，构建成莱航鸡大容量多位点基因打靶载体BAC-TDN-GID。每次克隆均经酶切或PCR、测序等鉴定DNA片段的插入及插入方向。以该载体为材料的多位点基因打靶技术将提高基因定点整合效率，解决外源基因不能稳定表达、安全性等部分问题，突破了DNA重复序列不能作为外源基因整合靶位点的禁区。
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| 关 键 词： | 基因打靶， 多位点， 载体， 细菌人工染色体， 重组酶系统， 莱航鸡， 重复序列 |
Construction of Vector of Multiple Loci Gene Targeting in Leghorn chicken Based on BAC with Cre/lox P System |
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| TANG Dong_Sheng,LI Fang,JIANG Hong,HU Da_Lin,ZHANG Xi_Quan,LI Yue_Qin and ZHOU Tian_Hong.Construction of Vector of Multiple Loci Gene Targeting in Leghorn chicken Based on BAC with Cre/lox P System[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(2). |
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| Authors: | TANG Dong_Sheng LI Fang JIANG Hong HU Da_Lin ZHANG Xi_Quan LI Yue_Qin and ZHOU Tian_Hong |
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| Institution: | Foshan University, Foshan 528000, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;Foshan University, Foshan 528000, China;Foshan University, Foshan 528000, China;Foshan University, Foshan 528000, China;College of Animal Science, Southern China Agriculture University, Guangzhou, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gene targeting multiple loci vector BAC Cre/lox P system Leghorn chicken repetitive sequence |
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