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| 鲑鱼降钙素串联基因的克隆、表达及重组蛋白的生物学活性 | |
| 引用本文： | 黄迎春,何璧梅,张义正,王欣荣.鲑鱼降钙素串联基因的克隆、表达及重组蛋白的生物学活性[J].生物技术,2003,13(6):8-10. |
| 作者姓名： | 黄迎春 何璧梅 张义正 王欣荣 |
| 作者单位： | 1. 四川抗菌素工业研究所,四川,成都,610051;四川大学,四川,成都,610064 2. 四川抗菌素工业研究所,四川,成都,610051 3. 四川大学,四川,成都,610064 |
| 摘 要： | 目的：将鲑鱼降钙素(salmon calcitoni，sCT)基因以同向串联方式连接，构建串联多拷贝基因的表达质粒pHis-nCT(n≤3)，并在原核中表达，研究表达产物的降钙活性。方法：采用半化学半酶促法合成sCT基因，利用基因的特点及特殊的酶切位点NdeI和SamI在表达载体pTrcHisC中进行sCT基因与载体基因的融合及sCT基因的串联，并在TOP10中表达串联多拷贝基因。表达产物形成包含体，对包含体变性、复性后，以Ni-Chelating Sepharose亲和纯化。用血清钙浓度测定法研究串联表达产物及裂解产物的降钙活性。结果：重组菌表达的串联融合蛋白经过变性、复性及亲合层析，纯度达到90％以上。活性试验表明，串联融合蛋白及其裂解产物可以抑制破骨细胞，降低血清钙浓度，且呈剂量效应关系。结论：原核表达质粒pTreHisC可以有效表达串联的sCT基因，重组的串联蛋白及裂解产物均有降钙活性。 |
| 关 键 词： | 鲑鱼降钙素 串联基因 克隆 表达 重组蛋白 生物学活性 |
| 文章编号： | 1004-311X(2003)06-0008-03 |
Cloning,Expression and Bioactivity of Tandem Salmon Calcitonin Gene |
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| HUANG Ying-chun.Cloning,Expression and Bioactivity of Tandem Salmon Calcitonin Gene[J].Biotechnology,2003,13(6):8-10. | |
| Authors: | HUANG Ying-chun |
| Institution: | HUANG Ying-chun~ |
| Abstract: | |
| Keywords: | Calcitonin Tandem gene Fusion protein Bioactivity |
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