| 人SNAP25基因重组腺病毒的构建与表达 |
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| 引用本文： | 庄国庆,王有利,马军丽,刘芬,王嵬,何燕.人SNAP25基因重组腺病毒的构建与表达[J].中国生物工程杂志,2008,28(10):18-22. |
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| 作者姓名： | 庄国庆 王有利 马军丽 刘芬 王嵬 何燕 |
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| 作者单位： | 中科院研究生院生命科学院 北京大学人民医院 首都医科大学公共卫生与家庭医学学院 中国科学院研究生院 首都医科大学公共卫生与家庭医学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，人事部留学回国人员科技活动择优课题，北京市优秀人才专项资助D类项目，教育部高等学校博士学科点专项科研基金 |
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| 摘 要： | 利用RT-PCR法，从人胰腺组织扩增出SNAP25基因，定向克隆至pENTR-TOPO载体获得重组质粒pENTR/D-TOPO-SNAP25。经PCR及测序验证其阅读框正确。再与腺病毒载体pAD／CMV／V5一DEST 发生LR重组反应，SNAP25取代pAD／CMV／V5一DESTTM中的ccdB-CmR基因，获得重组腺病毒载体pAD／CMV／V5一DEST-SNAP25(pAD- SNAP25)。重组腺病毒载体经Pac I酶切，脂质体法转染HEK-293A细胞．以鼠抗人SNAP25单克隆抗体为一抗，做荧光及Western Blot检测，结果表明重组腺病毒pAD-SNAP25在HEK-293A细胞中包装成功。重组腺病毒pAD-SNAP25感染大鼠胰岛，结果表明在高糖浓度下，外源性SNAP25蛋白的表达促进了大鼠胰岛素分泌。
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| 关 键 词： | SNAP25 重组 腺病毒 载体 人胚肾293A细胞 |
| 收稿时间： | 2008-05-19 |
| 修稿时间： | 2008-06-15 |
Construction and Expression of SNAP25 Gene Mediated by Recombinant Adenovirus |
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| ZHUANG Guo-qing,WANG You-li,MA Jun-li,LIU Feng,WANG Wei,HE Yan.Construction and Expression of SNAP25 Gene Mediated by Recombinant Adenovirus[J].China Biotechnology,2008,28(10):18-22. |
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| Authors: | ZHUANG Guo-qing WANG You-li MA Jun-li LIU Feng WANG Wei HE Yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SNAP25 |
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