| 多顺反子慢病毒载体介导编码基因在人胚胎干细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 李慧,李威,王倩,宋和存,郭毅.多顺反子慢病毒载体介导编码基因在人胚胎干细胞中的表达[J].生命科学研究,2009,13(2). |
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| 作者姓名： | 李慧 李威 王倩 宋和存 郭毅 |
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| 作者单位： | 1. 中国医科大学附属一院,妇科,中国辽宁,沈阳,110001
2. 中国医科大学附属一院,检验科,中国辽宁,沈阳,110001 |
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| 基金项目： | 教育部留学归国人员科研课题，辽宁省教育厅科研课题 |
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| 摘 要： | 人胚胎干细胞的基因修饰对于干细胞在体外的调控及促进干细胞在治疗方面的应用具有很高价值.探讨了以艾滋病病毒-1为基础的慢病毒栽体转导人胚胎干细胞,表达2种或3种转移基因的可行性和功效.应用脑心肌炎病毒的内部核糖体进入住点(IRFS)序列和/或口蹄疫病毒(FMDV)裂解因子2A构建双顺反子和三顺反子慢病毒载体,绿色荧光蛋白(eGFP)和O<'6>-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶作为检测基因.抗嘌呤基因(嘌呤-N-甲基转移酶;PAC)作为选择基因,转染人胚胎干细胞后经过嘌呤选择.通过流式细胞技术和蛋白印迹杂交方法检测eGFP和MGMT的表达.多基因慢病毒载体可以同时将2或3个基因转移到人胚胎干细胞.多顺反子慢病毒栽体转导人胚胎干细胞后经过嘌呤选择,可以使转移基因高效、均匀的表达,在人胚胎干细胞的基础和应用研究方面具有重要意义.
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| 关 键 词： | 人胚胎干细胞 慢病毒栽体 内部核糖体进入位点 裂解因子2A 甲基转移酶 |
Multicistronic Lentiviral Vector Mediated High Expression of Encoded Genes in Human Embryo Stem Cell |
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| LI Hui,LI Wei,WANG Qian,SONG He-cun,GUO Yi.Multicistronic Lentiviral Vector Mediated High Expression of Encoded Genes in Human Embryo Stem Cell[J].Life Science Research,2009,13(2). |
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| Authors: | LI Hui LI Wei WANG Qian SONG He-cun GUO Yi |
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