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外源基因在耻垢分枝杆菌中表达效率的研究
引用本文:程继忠,皇甫永穆,海涛. 外源基因在耻垢分枝杆菌中表达效率的研究[J]. 生物化学与生物物理进展, 1997, 24(3): 249-253
作者姓名:程继忠  皇甫永穆  海涛
作者单位:同济医科大学实验医学研究中心,武汉 430030;同济医科大学实验医学研究中心,武汉 430030;同济医科大学职业医学研究所,武汉 430030
基金项目:血吸虫病重点研究总理基金资助项目(94-Y-19).
摘    要:将外源基因——日本血吸虫26K抗原(Schistosoma japonicum 26K antigen,Sj26GST)基因克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pBCG-2000中, 构建四个不同的表达载体, 研究了它们在耻垢分枝杆菌中的表达效率.首先将含人结核杆菌热休克蛋白70(heat shock protein, hsp70)启动子的质粒pMT-70用NcoⅠ切, 进行两种不同的修饰, 得到不同的SD序列, 将Sj26GST基因克隆进去; 再将含hsp70启动子和Sj26GST的基因片段克隆到pBCG-2000中, 筛选出不同SD序列、不同方向和不同拷贝数的分枝杆菌表达载体四个.所表达的天然重组Sj26GST在SDS-PAGE上分子质量为26 ku处可见明显的表达蛋白带.通过薄层扫描分析, 发现表达质粒中, 双拷贝启动子-外源基因组合表达效率最高, 是单拷贝组合的1.6倍.而不同的克隆方向和不同的SD序列(两者相差3个碱基)对表达效率的影响不明显.

关 键 词:表达效率,分枝杆菌,外源基因
收稿时间:1996-06-04
修稿时间:1996-09-19

Investigation of Expression Efficiency of Foreign Gene in Mycobacteria smegmatis
CHENG Jizhong,HUANGFU Yongmu and HAI Tao. Investigation of Expression Efficiency of Foreign Gene in Mycobacteria smegmatis[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 1997, 24(3): 249-253
Authors:CHENG Jizhong  HUANGFU Yongmu  HAI Tao
Affiliation:Department of Medical Molecular Biology Research Center of Experimental Medicine Tongji Medical University, Wuhan 430030, China;Department of Medical Molecular Biology Research Center of Experimental Medicine Tongji Medical University, Wuhan 430030, China;Institute of Occupational Medicine, Tongji Medical University, Wuhan 430030, China
Abstract:
Keywords:expression efficiency   mycobacteria   foreign gene
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