| 耐热碱性磷酸酯酶的基因克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 袁有忠 盛小禹. 耐热碱性磷酸酯酶的基因克隆及在大肠杆菌中的表达[J]. 遗传学报, 1998, 25(4): 375-380 |
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| 作者姓名： | 袁有忠 盛小禹 |
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| 作者单位： | 复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室，复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室，复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室，复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室，复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室 上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(39380012)~~ |
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| 摘 要： | 以pUC118质粒为载体,以E.coil TGl为受体,构建了产耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)的菌株Thermus sp.FD3041的染色体基因文库。在包含1.2万个转化子的文库中,90％的转化子插入有3～10kb的外源DNA片段。用菌落原位碱性磷酸酯酶显色法从文库中筛选到5个阳性克隆。对其中的1个克隆(pTAP362)所产的TAP进行了研究,发现克隆的TAP与出发菌株所产的TAP的热稳定性、最适反应温度和最适pH等性质都相同。通过做物理图谱和测定部分缺失的质粒的TAP活性,将TAP基因定位于2kb的BamHⅠ-HindⅢ DNA片段上。模拟PCR实验表明该酶可用于PCR扩增产物的检出。
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| 关 键 词： | 耐热碱性磷酸酯酶 基因克隆 表达 |
Thermostable Alkaline Phosphatase from Thermus sp. FD3041: Cloning of the Gene and Expression in Escherichia coli |
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| YUAN You-zhong SHENG Xiao-yu LU Hong-yan TONG Shi MAO Yu-min. Thermostable Alkaline Phosphatase from Thermus sp. FD3041: Cloning of the Gene and Expression in Escherichia coli[J]. Journal of Genetics and Genomics, 1998, 25(4): 375-380 |
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| Authors: | YUAN You-zhong SHENG Xiao-yu LU Hong-yan TONG Shi MAO Yu-min |
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| Affiliation: | Institute of Genetics Fudan University Shanghai 200433 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Thermostable alkaline phosphatase Gene cloning Expression |
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