利用限制性内切酶诱导整合(REMI)获得稻瘟病菌突变体 |
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作者姓名: | 刘树俊 有江力 |
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作者单位: | 中国科学院遗传所植物细胞与染色体工程国家重点实验室(刘树俊),日本理化学研究所微生物制御研究室(有江力,山口勇) |
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摘 要: | 限制性内切酶诱导整合(RestrictionEnzyme-mediatedIntegration,简称REMI,下同)已被成功用于创造随机插入突变和提高转化频率。用限制酶消化的线状质粒pCSN43或pBF101,并加一定量的同种限制酶,转化稻瘟病菌(M.grisea)的原生质体后,得到约450个转化子。对一些表型进行测试后,获得两个分生孢子形态突变体。与野生型相比较,突变体的分生孢子细而且长,呈棒形。REMI非常有用,因其能提高转化频率,较容易地获得期望数目的转化子;限制性内切酶可随机切割寄主染色体,便于插入线状质粒,导致基因突变。可根据异常表型判定基因的功能,根据插入质粒克隆该基因。
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关 键 词: | 限制性内切酶诱导整合,稻瘟病菌,分生孢子,致病性,电子扫描,显微镜 |
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