| γ-谷氨酰基转肽酶（GGT）基因工程菌的构建及其发酵条件的初步研究 |
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| 引用本文： | 王娜,张洁,沈微,唐雪明,诸葛健.γ-谷氨酰基转肽酶（GGT）基因工程菌的构建及其发酵条件的初步研究[J].中国生物工程杂志,2006,26(11):48-53. |
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| 作者姓名： | 王娜 张洁 沈微 唐雪明 诸葛健 |
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| 作者单位： | 无锡江南大学生物工程学院工业微生物研究中心 无锡江南大学生物工程学院工业微生物研究中心 信阳师范学院生命科学学院 |
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| 摘 要： | 利用PCR技术以Bacillus subtilis SYU 20016基因组DNA为模板，扩增出1.8kb编码γ-谷氨酰基转肽酶的基因ggt，将其连接到温控表达载体pBV220，得到重组载体pBV220-ggt，重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达。SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量大小为65kD，同核酸序列测定所推导的值相符。对含有ggt的基因工程菌进行表达研究表明：发酵的培养温度为30℃，pH为7.2，装液量为20mL(在250mL的锥形瓶中)的条件下42℃诱导4h后，重组菌的γ-谷氨酰基转肽酶酶活力达到6U/mL，目前报道的非基因工程菌（枯草芽孢杆菌NX-2）酶活力最高仅为3.2U/mL。
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| 关 键 词： | 生物转化 发酵条件 质粒稳定性 γ-谷氨酰基转肽酶 茶氨酸 |
| 收稿时间： | 2006-06-21 |
| 修稿时间： | 2006-08-07 |
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