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毕赤嗜甲醇酵母工程菌高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶的研究
引用本文:华承伟,谢凤珍,王建华,史贤明. 毕赤嗜甲醇酵母工程菌高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶的研究[J]. 生物技术通讯, 2007, 18(1): 60-63
作者姓名:华承伟  谢凤珍  王建华  史贤明
作者单位:1. 河南科技学院,生命科技学院,河南,新乡,453003
2. 河南科技学院,新科学院,河南,新乡,453003
3. 中国农业科学院,饲料研究所,北京,100081
4. 上海交通大学,农学院,上海,201101
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金
摘    要:目的:对毕赤嗜甲醇酵母工程菌inu-26高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶的条件进行优化,找出最佳的外源蛋白表达条件。方法:在摇瓶优化培养的基础上进行发酵罐高密度培养,优化最佳产酶条件。结果:以葡萄糖为碳源、微量元素添加量100~200mL/L、甲醇浓度1g/L、pH6.0~7.0、诱导时间96h时酶的表达量最高;摇瓶模拟高密度培养表明影响酵母生长的最主要因素葡萄糖和硫酸铵的最佳浓度分别为20~45和11.5g/L;利用培养基F1进行高密度培养优于其他培养基,工程菌生长符合指数生长曲线,细胞生长延迟期为1.36h,比生长速率μ为0.4846h-1。结论:以葡萄糖为碳源,采用葡萄糖-甲醇混合诱导和100%甲醇单一诱导相结合,在菌体鲜重约为280g/L时连续诱导96h,菌体生长良好,不会出现自溶,且酶的表达量最高,为摇瓶培养的3倍多,酶活最高可达540 U/mL。

关 键 词:毕赤嗜甲醇酵母  黑曲霉菊粉内切酶  高密度培养
文章编号:1009-0002(2007)01-0060-04
修稿时间:2006-06-08

Expression of Endo-Inulinase from Aspergillus niger in High-Density Cultivation of Recombinant Pichia methanolica
HUA Cheng-wei,XIE Feng-zhen,WANG Jian-hua,SHI Xian-ming. Expression of Endo-Inulinase from Aspergillus niger in High-Density Cultivation of Recombinant Pichia methanolica[J]. Letters in Biotechnology, 2007, 18(1): 60-63
Authors:HUA Cheng-wei  XIE Feng-zhen  WANG Jian-hua  SHI Xian-ming
Affiliation:1. a. College of Life Sciences and Technology; b. College of Xinke; Science and Technology College of Henan, Xinxiang, 453003; 2. Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081; 3. Agricultural College, Shnghai Jiaotong University, Shanghai 201101; China
Abstract:
Keywords:Pichia methanolica  high-density cultivation  endo-inulinase
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