| 蔗糖磷酸化酶的分离纯化及其催化合成α-熊果苷的研究 |
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| 作者姓名： | 侯顾伟 马江锋 隋姗姗 徐冰 刘嵘明 姜岷 |
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| 作者单位： | 南京工业大学生物与制药工程学院材料与化学工程国家重点实验室,南京,210009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，"十一五"国家科技支撑计划重大项目，国家"973"计划项目 |
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| 摘 要： | 考察了肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)G123厌氧发酵产蔗糖磷酸化酶下游的分离纯化工艺.收集的菌体经超声破碎得到粗酶液,通过硫酸铵沉淀、透析、阴离子交换层析分离后获得了电泳纯的蔗糖磷酸化酶,酶活回收率为31.7%,酶的分子量约为55.7 kD,纯化后的蔗糖磷酸化酶比活为115.3 U/mg.该酶在中性及偏酸性(pH5.5-8.0)情况下,酶稳定性较好,较报道的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)B-1149的pH稳定范围宽.同时该酶在37℃保存2 h,酶活几乎没有下降.利用获得的纯酶以氢醌和蔗糖为底物催化合成α-熊果苷,在23 U/mL的酶反应体系中,60%蔗糖、5%氢醌、pH7.5,37℃,反应12 h,氢醌转化率达到16.3%,α-熊果苷的产量为20g/L.
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| 关 键 词： | 蔗糖磷酸化酶 α-熊果苷 转葡萄糖基 糖基转移酶 |
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