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| GST-Exendin-4在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化 | |
| 引用本文： | 张怡,周庆峰,贾孟,张红绪,李成伟.GST-Exendin-4在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化[J].生物技术通报,2011,0(6). |
| 作者姓名： | 张怡 周庆峰 贾孟 张红绪 李成伟 |
| 作者单位： | 1. 周口师范学院生命科学系,植物遗传与分子育种重点实验室,周口,466001 2. 商丘师范学院生命科学系,商丘,476000 3. 河南师范大学生命科学学院,新乡,453007 4. 周口师范学院生命科学系,植物遗传与分子育种重点实验室,周口,466001;商丘师范学院生命科学系,商丘,476000 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，河南省科技厅社会发展项目，河南省教育厅自然科学研究计划项目 |
| 摘 要： | 为了制备GST-Exendin-4融合蛋白,以本实验室构建好的pET22b-Exendin-4为模板,通过PCR扩增出Exendin-4基因,酶切克隆入pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Exendin-4.经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在不同浓度的IPTG和不同温度诱导下,经SDS-PAGE分析鉴定,表达出Mr约为30 kD的目的蛋白,灰度扫描显示目的蛋白占菌体总蛋白的29.9%,超声裂解后的上清通过Sepharose 4B亲和层析纯化、透析、除盐及冷冻干燥得到高纯度的目的蛋白.本研究成功制备了高纯度的GST-Exendin-4融合蛋白,为下一步进行目的蛋白大规模的生产打下了良好的基础. |
| 关 键 词： | 融合蛋白 可溶表达 亲和纯化 |
Soluble Expression and Purification of Fusion Protein GST-Exendin-4 in E.coli |
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| Zhang Yi,Zhou Qingfeng,Jia Meng,Zhang Hongxu,Li Chengwei.Soluble Expression and Purification of Fusion Protein GST-Exendin-4 in E.coli[J].Biotechnology Bulletin,2011,0(6). | |
| Authors: | Zhang Yi Zhou Qingfeng Jia Meng Zhang Hongxu Li Chengwei |
| Abstract: | |
| Keywords: | Exendin-4 |
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