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aiiA基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达
引用本文:娄瑞娟,张霞,罗利龙,徐操,宋水山.aiiA基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达[J].微生物学通报,2010,37(5):0658-0663.
作者姓名:娄瑞娟  张霞  罗利龙  徐操  宋水山
作者单位:1. 河北省科学院生物研究所河北石家庄050051;河北工业大学化工学院,天津,300100
2. 河北省科学院生物研究所河北石家庄050051
3. 河北省科学院生物研究所河北石家庄050051;河北师范大学,河北,石家庄,050016
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 30970030); 国家重大基础研究前期研究专项项目(No. 2009CB126010); 河北省自然科学基金项目(No. C2006000707)
摘    要:构建携带N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(aiiA)的重组毕赤酵母表达载体pPIC3.5K-aiiA,采用电转化方法转入毕赤酵母GS115,经营养缺陷型培养基、表型鉴定和高G418浓度筛选获得高拷贝表达盒的酵母转化子,用0.5%甲醇诱导表达,RT-PCR鉴定可检测到重组酵母中编码目的基因成熟肽的mRNA,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,aiiA基因在毕赤酵母中成功表达,用指示菌紫色杆菌CV026检测发现目的蛋白具有降解N-酰基高丝氨酸内酯的活性。

关 键 词:aiiA基因    毕赤酵母    基因表达

Construction of an aiiA-expressing Vector and Its Expression in Pichia pastoris
LOU Rui-Juan,ZHANG Xi,LUO Li-Long,XU Cao and SONG Shui-Shan.Construction of an aiiA-expressing Vector and Its Expression in Pichia pastoris[J].Microbiology,2010,37(5):0658-0663.
Authors:LOU Rui-Juan  ZHANG Xi  LUO Li-Long  XU Cao and SONG Shui-Shan
Institution:1. Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang, Hebei 050051, China; 2. College of Chemistry and Chemical Engineering, Hebei University of Technology, Tianjin 300100, China;1. Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang, Hebei 050051, China;1. Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang, Hebei 050051, China; 2. College of Chemistry and Chemical Engineering, Hebei University of Technology, Tianjin 300100, China;1. Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang, Hebei 050051, China; 3. Hebei Normal University, Shijiazhuang, Hebei 050016, China;1. Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang, Hebei 050051, China
Abstract:
Keywords:aiiA gene  Pichia pastoris  Gene expression
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