逆转录病毒载体介导的人多药耐药基因(mdr-1)导入小鼠造血细胞的实验研究 |
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引用本文: | 高文谦,裴雪涛,王立生,徐黎,吴祖泽.逆转录病毒载体介导的人多药耐药基因(mdr-1)导入小鼠造血细胞的实验研究[J].中国应用生理学杂志,1998(2). |
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作者姓名: | 高文谦 裴雪涛 王立生 徐黎 吴祖泽 |
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作者单位: | 军事医学科学院放射医学研究所 |
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基金项目: | 国家863计划青年科学基金 |
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摘 要: | 本文利用逆转录病毒介导的基因转移方法,将人多药耐药基因mdr-1导入小鼠造血细胞,并对转基因造血细胞的耐药性及移植特性进行了初步研究。含人mdr-1cDNA的重组逆转录病毒载体质粒,经脂质体介导的基因转移方法导入包装细胞PA317,再经秋水仙素筛选。获得产逆转录病毒的包装细胞,其病毒滴度可达1.2×105cfu/ml。在含小鼠骨髓贴壁细胞层的长期培养体系中,利用逆转录病毒上清对造血细胞进行转染。通过抗性CFU-CM检测,其基因转移效率可达7.0%。将转基因造血细胞移植经照射预处理的小鼠,可重建受体小鼠造血功能。小鼠造血重建后4个月,其骨髓造血细胞与外周血细胞可检测到人mdr-1cDNA,且骨髓造血细胞对秋水仙素仍保留抗性
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关 键 词: | 人mdr-1基因 逆转录病毒 基因转移 小鼠造血细胞 |
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