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| 抗乙型肝炎病毒表面抗原T7噬菌体抗体库的构建 | |
| 引用本文： | 刘兵,马晓宇,李响,罗恩杰. 抗乙型肝炎病毒表面抗原T7噬菌体抗体库的构建[J]. 微生物学杂志, 2012, 32(1): 84-87 |
| 作者姓名： | 刘兵 马晓宇 李响 罗恩杰 |
| 作者单位： | 1. 中国医科大学基础医学院病原生物教研室,辽宁沈阳,110001 2. 中国医科大学96期七年制临床专业,辽宁沈阳,110001 3. 沈阳医学院奉天医院药剂科,辽宁沈阳,110024 |
| 摘 要： | 构建T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体.从抗-HBs阳性患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第1条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PCR组成scFv基因,并将其与T7噬菌体载体的2个臂相连接.体外包装后,在宿主菌BLT5403中,扩增重组噬菌体抗体库.以乙型肝炎病毒表面抗原进行4轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,酶免疫实验检测抗体活性.所建抗体库库容为1.53×107,扩增后初级库滴度为2.42×1010pfu/mL.以乙型肝炎病毒表面抗原筛选后抗体出现特异性富集,经酶免疫实验鉴定,得到2株与HBsAg抗原特异结合的噬菌体抗体,成功构建了抗HBsAg蛋白T7噬菌体抗体库. |
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒表面抗原 scFv T7噬菌体抗体库 |
Construction of a T7 Phage Antibody Library of Anti-Hepatitis B Surface Antigen |
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| LIU Bing,MA Xiao-yu,LI Xiang,LUO En-jie. Construction of a T7 Phage Antibody Library of Anti-Hepatitis B Surface Antigen[J]. Journal of Microbiology, 2012, 32(1): 84-87 | |
| Authors: | LIU Bing MA Xiao-yu LI Xiang LUO En-jie |
| Affiliation: | 1(1.Dept.of Patho.Biol.,Basic Med.Coll.,2.Clin.Med.,96th 7-year’s Schl.,China Medical University,Shenyang 110001; 3.Dept.of Medicament,Fengtian Hosp.Affil.to Shenyang Med.Coll.,Shenyang 110024) |
| Abstract: | |
| Keywords: | HbsAg scFv T7 phage antibody library |
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