| 摘 要： | 将葫芦科植物丝瓜和西葫芦当天开放的新鲜花粉放入0.025M,pH7.8,Tris-HCI缓冲液中,在1—50分钟不等时间内提取(含10％蔗糖,100ppm Ca~( ),100ppm硼)滤液用90％饱和度的硫酸铵沉淀,透析除盐(或过Sephadex G-25凝胶柱),然后在紫外光光度计280nm下测OD值。 不同时间取样测定表明,西葫芦花粉在1分钟内提取的滤液中蛋白质含量已达全部释放的蛋白质的一半左右,以后缓慢增加,20分钟后不再继续释放。 西葫芦花粉渗出液经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,考马斯亮蓝染色,可分出明显的7个区带,19条蛋白带。丝瓜花粉经同样处理后也可分出7个区带,18条蛋白带。两者电泳图型不完全一样。 两种植物花粉壁蛋白都显示出中性酯酶、酸性磷酸酯酶同功酶带,但两者都没有碱性磷酸酯酶。 两种植物的花粉壁蛋白的电泳胶条,用过碘酸-Schiff试剂染色后出现三条红色带,表明这部分蛋白质是糖蛋白。蛋白样品经酸水解后纸层析分离,表明两种植物花粉壁蛋白均含有三种糖:半乳糖,阿拉伯糖及一个尚未判明的糖。 两种植物的花粉壁蛋白都有热稳定的成份。 花粉壁蛋白经SDS、β-巯基乙醇凝胶电泳后出现多条染色带,经与在同样条件下电泳的标准蛋白比较,其中主要蛋白的分子量范围为11700—12000、25000、43000、46000和76000道尔顿。 在丝瓜(母本)和南
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