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抗栓肽(Decorsin)在大肠杆菌中的克隆及表达
引用本文:焦建伟,张磊亮,俞梅敏,茹炳根. 抗栓肽(Decorsin)在大肠杆菌中的克隆及表达[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2001, 17(5): 602-605
作者姓名:焦建伟  张磊亮  俞梅敏  茹炳根
作者单位:焦建伟(北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室北京100871)      张磊亮(北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室北京100871)      俞梅敏(北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室北京100871)      茹炳根(北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室北京100871)
摘    要:将人工合成的寡核苷酸片段进行体外连接 ,得到编码抗栓肽 (decorsin)的cDNA .将此cDNA克隆到表达载体pMAL p2x中 ,经核苷酸序列测定结果正确 .在大肠杆菌TB1中通过IPTG进行诱导表达 ,融合蛋白的表达量为 8%左右 .融合蛋白通过亲和柱一步纯化 ,SDS PAGE显示为一条主要蛋白质电泳条带 .血小板聚集实验表明 ,融合蛋白具有较强的抑制血小板聚集的功能 ,抑制常数IC50为 3 70nmol L .

关 键 词:抗栓肽  抑制血小板聚集  表达  
收稿时间:2001-10-20
修稿时间:2000-12-06

Cloning and Expression of an Antithrombolytic Peptide Decorsin in E.coli
JIAO Jian|wei,ZHANG Lei|liang,YU Mei|min,RU Bing|gen. Cloning and Expression of an Antithrombolytic Peptide Decorsin in E.coli[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2001, 17(5): 602-605
Authors:JIAO Jian|wei  ZHANG Lei|liang  YU Mei|min  RU Bing|gen
Affiliation:(National Laboratory of Protein Engineering,College of Life Sciences,Peking University,Beijing 100871,China
Abstract:Decorsin cDNA was obtained and inserted into expression vector pMAL|p2x by DNA recombinant method,which was checked by nucleotide sequencing.The fusion protein of MBP|decorsin was produced by IPTG induction in E.coli (TB1).The expression level was approximately 8%.The fusion protein was purified by affinity column,showing one main protein band in SDS|PGE analysis.The platelet aggregation experiment revealed that the fusion protein had the activity of anti|platelet with IC 50 value of 370 nmol/L.
Keywords:decorsin  anti-platelet aggregation  expression
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