沉默ST3Gal III抑制MDA-MB-231细胞黏附和侵袭能力

我们前期研究表明α2,3-唾液酸水平与乳腺癌侵袭转移密切相关。人α2,3-唾液酸转移酶（ST3Gal Ⅲ）可催化合成细胞表面的α2,3-唾液酸，并在乳腺癌组织中高表达，此酶活性与肿瘤转移潜能密切相关，但其机制尚未阐明。本研究中我们将继续探讨ST3Gal Ⅲ在对乳腺癌转移关键步骤粘附和侵袭中的作用。构建特异靶向ST3Gal Ⅲ的短发夹RNA（shRNA）序列的慢病毒载体，采用细胞转染沉默乳腺癌MDA-MB-231细胞的ST3Gal Ⅲ，经实时定量PCR及Western印迹检测转染后细胞ST3Gal Ⅲ mRNA及蛋白表达，验证构建了稳定下调ST3Gal Ⅲ表达的两个细胞克隆，分别记作shRNA-2、shRNA-4。细胞表面α2,3-唾液酸是ST3Gal Ⅲ下游产物，可代表酶活性。流式细胞术分析结果证实，shRNA-2、shRNA-4细胞表面α2,3-唾液酸的含量显著降低（P<0.05）。细胞黏附、细胞迁移及侵袭能力等功能学检测结果表明，shRNA细胞黏附能力及侵袭能力明显降低（P<0.05）。β1整合素表达与肿瘤侵袭能力获取密切相关。本研究中，沉默ST3Gal Ⅲ可抑制β1整合素表达（P<0.05）。这些结果提示，ST3Gal Ⅲ在乳腺癌转移关键步骤黏附和侵袭中具有重要作用，沉默ST3Gal Ⅲ抑制MDA MB-231细胞黏附和侵袭能力，其作用机制可能是通过下调β1整合素表达。此研究从新的视角认识了乳腺癌转移的机制，并可能提供乳腺癌转移治疗的新靶点。