猪链球菌2型Ⅳ型分泌系统组分VirD4与毒力相关性分析 |
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作者姓名: | 王俊平 郑玉玲 骈亚亚 郭洁 郝淮杰 姜永强 |
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作者单位: | 军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京100071,军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京100071,军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京100071,中国科学院微生物研究所,病原微生物与免疫学重点实验室,北京100101,中国科学院微生物研究所,病原微生物与免疫学重点实验室,北京100101,军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京100071 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81371766,81171528,81401642) |
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摘 要: | 摘要:【目的】构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33毒力岛89 K上的Ⅳ型分泌系统组分VirD4敲除突变株,初步分析其活性和毒力,为进一步研究猪链球菌2 型在逃避宿主天然免疫杀伤中的作用提供基础。【方法】以05ZYH33基因组为模板,PCR扩增VirD4基因上下游同源臂,以穿梭质粒pSET1为模板,PCR扩增氯霉素抗性基因Cm,通过重叠PCR技术搭建上述3个片段并连接至温敏载体pSET4s,构建基因敲除载体pSET4s∷VirD4;通过同源重组构建基因敲除突变株ΔVirD4;通过体外全血杀伤实验、CD1小鼠竞争感染及攻毒实验对突变株和野生株的毒力进行比较分析。【结果】获得了基因敲除突变株ΔVirD4,通过对比发现其毒力与野生株相比有所降低。【结论】猪链球菌2型Ⅳ型分泌系统组分VirD 与其毒力相关,并在早期抵抗天然免疫细胞杀伤中发挥一定作用。
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关 键 词: | 关键词:猪链球菌2型,89 K毒力岛,Ⅳ型分泌系统,毒力 |
收稿时间: | 2014-08-03 |
修稿时间: | 2014-10-24 |
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