| 利用酵母人工染色体(YAC)减数分裂同源重组构建人免疫球蛋白κ链基因组大片段 |
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| 引用本文： | 聂志妍,卢步峰,徐燕萍,卢波,郭礼和.利用酵母人工染色体(YAC)减数分裂同源重组构建人免疫球蛋白κ链基因组大片段[J].分子细胞生物学报,2003,36(2):130-136. |
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| 作者姓名： | 聂志妍 卢步峰 徐燕萍 卢波 郭礼和 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，上海赛达生物技术研究中心 上海 200031，上海 201203 |
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| 摘 要： | 具有同源重叠区的酵母人工染色体(YAC)可以利用酵母细胞减数分裂进行同源重组,从而构建更大的人工染色体基因组,这对生命科学基础研究和生物技术应用研究有着非常重要的意义。本实验以两个含人免疫球蛋白κ链基因簇片段的YAC克隆为材料,通过酵母改型、异型接合、二倍体发孢、单孢子筛选和分子生物学鉴定等技术和方法,利用酵母菌减数分裂同源重组机制,构建了一条包含人的免疫球蛋白κ轻链32个Vκ基因、5个Jκ基因、Cκ基因、Eκ基因和κde基因的YAC重组体,长度约400kb。同时,本实验利用溶壁酶消化法获取单孢子重组体,代替了传统的显微分孢操作。使得利用酵母人工染色体减数分裂同源重组的技术更加简便可行。
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| 关 键 词： | 酵母人工染色体 减数分裂 同源重组 人免疫球蛋白κ轻链 |
| 修稿时间： | 2002年11月21 |
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