豆血红蛋白在毕赤酵母中的表达条件优化

【背景】豆血红蛋白可赋予素肉制品类似牛肉的红褐色质地，已被美国食品药物监督管理局批准作为人造素肉的着色剂，近年来受到广泛关注。【目的】优化毕赤酵母产豆血红蛋白的培养条件，提高毕赤酵母产豆血红蛋白的产量。【方法】首先通过单因素试验研究蛋白胨种类、大豆蛋白胨浓度、铁盐种类及血红素浓度在诱导阶段对毕赤酵母产豆血红蛋白的影响；然后通过Plackett-Burman试验设计筛选出对豆血红蛋白产量影响最大的3个因素，再通过最陡爬坡法确定3个因素的变化范围，对3个因素进行响应面分析；最后根据响应面结果进行摇瓶发酵和发酵罐高密度发酵。【结果】单因素试验发现：用4%大豆蛋白胨作为主要氮源、甲醇诱导浓度为1.5%、血红素浓度为5μmol/L时发酵效果较好，经过响应面优化后得到蛋白胨浓度为51.48 g/L、pH 5.66、培养基装液量35.84mL/250mL是最优发酵条件。在此优化条件下，LegH摇瓶发酵产量为0.191 mg/mL，与预测值(0.183 mg/mL)比较接近。采用5 L发酵罐进行高密度发酵，LegH产量最高达到0.384 mg/mL。【结论】优化了毕赤酵母表达豆血红蛋白的发酵条件，获得...

Optimization of leghemoglobin expression conditions in Pichia pastoris