| 甜菜夜蛾触角全长cDNA文库的构建与分析 |
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| 引用本文： | 张丽芳,朱家颖,杨发忠,赵宁,杨斌.甜菜夜蛾触角全长cDNA文库的构建与分析[J].生物技术,2012,22(4):11-14. |
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| 作者姓名： | 张丽芳 朱家颖 杨发忠 赵宁 杨斌 |
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| 作者单位： | 西南林业大学云南省森林灾害预警与控制重点实验室,云南昆明,650224 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，云南省应用基础研究面上项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建甜菜夜蛾触角全长cDNA文库。方法:利用TRIzol试剂提取甜菜夜蛾触角总RNA,以此为模板,通过SMAR-TScribeTM反转录酶反转录合成第一链cDNA,引物扩增获得双链cDNA,经Proteinase K消化、SfiⅠ酶切和CHROMA SPIN-400Column分级分离后,收集400～2 000 bp之间的片段重组于改造的pUC19载体并转化至大肠杆菌Escherichia coli DH5α,最终构建获得甜菜夜蛾触角全长cDNA文库。结果:对文库进行滴度测定和重组率分析,结果表明构建的cDNA初级文库滴度为1.6×107pfu/ml,重组率为94%,插入片段大小为0.5～3.0 kb,平均长度在1 kb以上,表明构建获得的文库是一个高质量的文库。结论:该文库的构建为今后克隆甜菜夜蛾嗅觉相关基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 甜菜夜蛾 触角 全长cDNA文库 SMART技术 |
Construction and Analysis of Full Length cDNA Library from the Antenna of Spodoptera exigua |
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| ZHANG Li-fang
,
ZHU Jia-ying
,
YANG Fa-zhong
,
ZHAO Ning
,
YANG Bin.Construction and Analysis of Full Length cDNA Library from the Antenna of Spodoptera exigua[J].Biotechnology,2012,22(4):11-14. |
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| Authors: | ZHANG Li-fang ZHU Jia-ying YANG Fa-zhong ZHAO Ning YANG Bin |
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| Institution: | *(Key Laboratory of Forest Disaster Warning and Control of Yunnan Province,Southwest Forestry University,Kunming 650224,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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