| 乙酰氨基半乳糖转移酶14多抗的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 吴琛,郭晓丹,宋玉华,张博,马思思,邓昊,葛建峰,李世奇,徐强,康现江.乙酰氨基半乳糖转移酶14多抗的制备及鉴定[J].中国生物工程杂志,2011,31(2):74-78. |
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| 作者姓名： | 吴琛 郭晓丹 宋玉华 张博 马思思 邓昊 葛建峰 李世奇 徐强 康现江 |
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| 作者单位： | 1. 河北大学生命科学学院 保定 071002;
2. 青岛大学医学院附属医院 青岛 266003;
3. 河北大学药学院 保定 071002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30800180); 河北省自然科学基金(C2009000191); 河北省教育厅科学研究计划(2008-106); 河北省科技支撑计划(07275552)资助项目 |
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| 摘 要： | 利用生物信息学方法分析乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)蛋白序列, 根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择一段多肽序列作为抗原用于抗体制备。将该DNA片段插入pET-DsbA,构建原核表达载体pET-DsbA-GALNT14。用IPTG诱导表达蛋白,经镍柱纯化蛋白后免疫新西兰大白兔,获得GALNT14多克隆抗血清。用免疫扩散和免疫印迹检测抗体效价及特异性。结果显示,成功表达并纯化了目的蛋白。免疫动物后获得了效价较高、特异性强的GALNT14多克隆抗体,GALNT14蛋白在人乳腺癌和肾癌细胞株中均有表达。该结果为进一步研究GALNT14的功能及其在肿瘤发生发展的作用方面奠定了基础。
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| 关 键 词： | GALNT14 原核表达 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2010-08-16 |
| 修稿时间： | 2010-09-23 |
Preparation and Identification of Polyclonal Antibody Against Polypeptide N-Acetylgalactosaminyltransferase 14(GALNT 14) |
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| WU Chen,GUO Xiao-dan,SONG Yu-hua,ZHANG Bo,MA Si-si,DENG Hao,GE Jian-feng,LI Shi-qi,XU Qiang,KANG Xian-jiang.Preparation and Identification of Polyclonal Antibody Against Polypeptide N-Acetylgalactosaminyltransferase 14(GALNT 14)[J].China Biotechnology,2011,31(2):74-78. |
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| Authors: | WU Chen GUO Xiao-dan SONG Yu-hua ZHANG Bo MA Si-si DENG Hao GE Jian-feng LI Shi-qi XU Qiang KANG Xian-jiang |
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| Institution: | WU Chen1 GUO Xiao-dan 1 SONG Yu-hua 2 ZHANG Bo1 MA Si-si 3 DENG Hao1 GE Jian-feng 1 LI Shi-qi1 XU Qiang1 KANG Xian-jiang 1(1 College of Life Sciences,Hebei University,Baoding 071002,China) (2 Department of Oncology,The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College,Qingdao 26600,China) (3 College of Pharmaceutical Sciences,China) |
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| Abstract: | The sequence of polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 14(GALNT14) was analyzed using bioinformatics.A peptide sequence was selected according to hydrophilicity,antigenicity,flexibility and accessibility.The cDNA of interest was subcloned into a eukaryotic expression vector pET-DsbA to construct pET-DsbA-GALNT14.The expression of recombinant fusion protein was induced by IPTG,then purified by Ni-IDA Resin.Polyclonal antibody against GALNT14 was prepared from immuned New Zealand white rabbit.The titer... |
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| Keywords: | GALNT14 Prokaryotic expression Polyclonal antibody |
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