| 光裸星虫ISSR-PCR反应体系的单因素优化试验 |
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| 引用本文： | 彭银辉,宋忠魁,蔡小辉,杨家林,刘丽梅.光裸星虫ISSR-PCR反应体系的单因素优化试验[J].生物技术通报,2011(1). |
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| 作者姓名： | 彭银辉 宋忠魁 蔡小辉 杨家林 刘丽梅 |
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| 作者单位： | 广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,北海536000 |
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| 基金项目： | 广西海洋生物技术重点实验室主任基金课题(GKLMBT-D0801) |
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| 摘 要： | 以光裸星虫为试验材料,通过单因素方法对影响其ISSR-PCR扩增效果的因子(模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶、甲酰胺和二甲基亚砜)浓度进行研究。确立适合光裸星虫ISSR-PCR的反应体系:25μL体积含1×PCR buff-er、模板DNA用量为10-50 ng、TaqDNA聚合酶为0.75-1.75 U、Mg2+浓度为1.5-2.5 mmol/L、dNTP浓度为0.20 mmol/L,引物浓度为0.8-1.2μmol/L,甲酰胺和二甲基亚砜的添加并不能优化光裸星虫ISSR-PCR反应结果。利用所建立的体系对广西北海群体的20个光裸星虫个体基因组DNA进行ISSR-PCR扫描,结果表明,优化后的体系均能扩增出清晰、多态性高的条带。
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| 关 键 词： | 光裸星虫 ISSR 优化 单因素 |
Optimization for ISSR-PCR Reaction Conditions of Sipunculus nudus by Single Factor |
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| Peng Yinhui,Song Zhongkui,Cai Xiaohui,Yang Jialin,Liu Limei.Optimization for ISSR-PCR Reaction Conditions of Sipunculus nudus by Single Factor[J].Biotechnology Bulletin,2011(1). |
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| Authors: | Peng Yinhui Song Zhongkui Cai Xiaohui Yang Jialin Liu Limei |
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| Institution: | Peng Yinhui Song Zhongkui Cai Xiaohui Yang Jialin Liu Limei(Guangxi Institute of Oceanology,Guangxi Key Laboratory of Marine Biotechnology,Beihai 536000) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sipunculus nudus ISSR-PCR Optimization Single factor |
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