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盐胁迫下胡杨cDNA文库的构建及其nhx基因的克隆
引用本文:朱馨蕾,马艳,张富春. 盐胁迫下胡杨cDNA文库的构建及其nhx基因的克隆[J]. 植物研究, 2007, 27(1): 82-88
作者姓名:朱馨蕾  马艳  张富春
作者单位:新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室,河北科技师范大学,新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室 新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046,秦皇岛066004,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046
基金项目:国家自然科学基金;教育部科学技术研究重点项目;新疆高等学校创新研究群体基金
摘    要:采用CTAB法提取经600 mmol·L-1 NaCl胁迫处理后的胡杨总RNA,利用SMART技术构建载体为λTriplEx2的盐胁迫条件下胡杨的表达型cDNA文库(SSL)。文库的滴度为1.2×106 pfu·ml-1,重组率约为90.6%,扩增后的滴度为3×109 pfu·ml-1,容量约为2.4×1011。插入片段长度均大于400 bp,平均长度约为790 bp。从文库中随机挑选32个阳性克隆进行3′端测序,并将测序结果通过NCBI (National Center for Biotechnology Information) 数据库进行比较,发现有23个EST序列与已知序列有明显的同源性,而其余的与NCBI中的已知序列相似性较低(e值>10-4),可能是未知基因。其中序列SSL061、SSL179与脱水素序列有较高的序列一致性。同时合成引物,通过PCR扩增文库的方法,从中筛选获得存在于植物细胞膜上并在植物受盐胁迫时起重要作用的nhx基因,进一步验证了文库的质量。

关 键 词:胡杨;盐胁迫;cDNA文库;nhx
修稿时间:2006-04-25

Construction of a cDNA Library and Cloning of nhx cDNA from Populus euphratica under Salt Stress
ZHU Xin-Lei,MA Yan,ZHANG Fu-Chun. Construction of a cDNA Library and Cloning of nhx cDNA from Populus euphratica under Salt Stress[J]. Bulletin of Botanical Research, 2007, 27(1): 82-88
Authors:ZHU Xin-Lei  MA Yan  ZHANG Fu-Chun
Affiliation:1. Key Laboratory of Molecular Biology, College of Life Science and Technology, Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering,Xinjiang University,Urumqi 830046; 2. Hebei Normal University of Science and Technology, Qinghuangdao 066004
Abstract:
Keywords:nhx
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