伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE-/gI/GFP+缺失株的构建 |
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引用本文: | 姜焱,侯玉峰,陈溥言.伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE-/gI/GFP+缺失株的构建[J].微生物学报,2003,43(1). |
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作者姓名: | 姜焱 侯玉峰 陈溥言 |
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作者单位: | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室 南京 210095;南京出入境检验检疫局 南京 210001 |
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摘 要: | 在构建了含伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因5'端363bp,同时把绿色荧光蛋白(GFP)基因表达盒插入到缺失部分,并在下游引入一个多克隆位点,构建了缺失转移载体pgEIGFP。用DOTAP转染试剂盒将pgEIGFP转染了感染PRVSH的BHK21细胞,待出现80%病变后收获病毒,并以蚀斑法得到纯化的缺失了gE/gI重组病毒株。小鼠试验证实了缺失株的毒力有所下降。
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关 键 词: | 伪狂犬病病毒,转移载体质粒,gE-/gI-/GFP+缺失株,绿色荧光蛋白(GFP)表达盒 |
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