| 逆转录-聚合酶螺旋反应检测结核分枝杆菌的应用 |
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| 引用本文： | 于昌萍,于 彬,蔡为为,刘佰成,于 淼,王东亮.逆转录-聚合酶螺旋反应检测结核分枝杆菌的应用[J].现代生物医学进展,2020(5):879-884. |
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| 作者姓名： | 于昌萍 于 彬 蔡为为 刘佰成 于 淼 王东亮 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军北部战区总医院呼吸科 辽宁 沈阳 110003;辽宁省人民医院骨科 辽宁 沈阳 110015 |
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| 基金项目： | 辽宁省自然科学基金项目（201510274-301）；辽宁省科学事业公益基金项目（2015001021） |
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| 摘 要： | 目的:建立并应用逆转录-聚合酶螺旋反应(RT-PSR)快速检测结核分枝杆菌(MTB)。方法:针对结核分枝杆菌16S rRNA基因设计特异性引物,通过反应条件的优化初步建立结核分枝杆菌的RT-PSR扩增方法;随后,用2株结核分枝杆菌和11株其他致病菌进行RT-PSR、RT-LAMP和荧光定量PCR法的特异性与敏感性试验;利用RT-PSR法、罗氏培养法、RT-LAMP法和荧光定量PCR法对83名结核病患者的痰液标本进行诊断对比。结果:成功建立并优化了MTB的RT-PSR检测方法,与RT-LAMP法相比,两者特异性均为100%;RT-PSR法的检测灵敏性为1 CFU/mL,为荧光定量PCR法的10倍,且检测下限可达0.1 pg/μL;临床患者痰液样本检测结果表明,与罗氏培养法相比,RT-PSR法和RT-LAMP法的阳性率分别为98.80%(P0.05)和96.39%(P0.05),差异均具有统计学意义。结论:与传统检测法相比,RT-PSR法对于诊断临床样本中的MTB具有良好的特异性和敏感性,适合基层医疗单位防治MTB的推广和应用。
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 聚合酶螺旋反应 临床样本 快速检测 |
| 收稿时间： | 2019/8/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2019/9/23 0:00:00 |
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