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基于数值鉴定法的肠杆菌科生化试剂盒的研制及效果评价
引用本文:金乐萱,万强,曹璐璐,叶青华,王迅,张菊梅,蔡芷荷,吴清平.基于数值鉴定法的肠杆菌科生化试剂盒的研制及效果评价[J].微生物学报,2024,64(5):1668-1682.
作者姓名:金乐萱  万强  曹璐璐  叶青华  王迅  张菊梅  蔡芷荷  吴清平
作者单位:合肥工业大学食品与生物工程学院, 安徽 合肥 230601;广东省科学院微生物研究所 华南应用微生物国家重点实验室 广东省微生物安全与健康重点实验室 国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台, 广东 广州 510070;广东环凯生物科技有限公司, 广东 肇庆 526238
基金项目:国家重点研发项目(2022YFF1100700);广东省自然科学基金(2022A1515011740)
摘    要:【背景】肠杆菌科细菌是食源性和临床感染的主要病原菌,对人类和动物健康有重要影响,以API 20E为“金标准”的数值鉴定法是其主要的鉴定方法之一,但现有的数值鉴定方法存在手工单个加样或/和准确率低、价格贵的问题。【目的】研制出半自动化、准确性高及价格低的肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒。【方法】在本团队前期建立的肠杆菌科数值鉴定系统理论模型与配套软件的基础上,设计并优化筛选出的24种生化基质微量化配方,在此基础上,研制半自动冻干鉴定条;以现行商品化的数值鉴定条API 20E、MALDI-TOF MS及16S rRNA基因测序为对照,对研制的集半自动生化鉴定条与在线分析软件于一体的生化试剂盒进行效果评价。【结果】共获得458株肠杆菌科细菌的生化谱,在属水平总体鉴定准确率达到98.5%,在种水平总体鉴定准确率达到96.5%;仅需两次加样即可获得鉴定结果,且价格仅为API 20E的4.46%;产品保质期为7 d,生化试验具有稳定可重复性。【结论】本研究研制出的半自动化肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒简便经济、准确率高,为肠杆菌科细菌的鉴定提供技术支撑,并为其他科属细菌的数值鉴定生化产品的开发提供技术指引。

关 键 词:肠杆菌科  数值鉴定  生化试剂盒  效果评价
收稿时间:2023/11/15 0:00:00
修稿时间:2024/2/19 0:00:00

Development and performance evaluation of a biochemical kit for identification of Enterobacteriaceae based on numerical identification method
JIN Lexuan,WAN Qiang,CAO Lulu,YE Qinghu,WANG Xun,ZHANG Jumei,CAI Zhihe,WU Qingping.Development and performance evaluation of a biochemical kit for identification of Enterobacteriaceae based on numerical identification method[J].Acta Microbiologica Sinica,2024,64(5):1668-1682.
Authors:JIN Lexuan  WAN Qiang  CAO Lulu  YE Qinghu  WANG Xun  ZHANG Jumei  CAI Zhihe  WU Qingping
Institution:School of Food and Biological Engineering, Hefei University of Technology, Hefei 230601, Anhui, China;State Key Laboratory of Applied Microbiology Southern China, Guangdong Provincial Key Laboratory of Microbial Safety and Health, National Health Commission Science and Technology Innovation Platform for Nutrition and Safety of Microbial Food, Institute of Microbiology, Guangdong Academy of Sciences, Guangzhou 510070, Guangdong, China;Guangdong Huankai Biotechnology Co., Ltd., Zhaoqing 526238, Guangdong, China
Abstract:
Keywords:Enterobacteriaceae  numerical identification  biochemical kit  performance evaluation
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