高密度微团培养法对人骨关节炎软骨细胞分化影响的实验研究 |
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引用本文: | 田野,徐莹,付勤.高密度微团培养法对人骨关节炎软骨细胞分化影响的实验研究[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2014(4). |
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作者姓名: | 田野 徐莹 付勤 |
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作者单位: | 中国医科大学附属盛京医院脊柱关节骨科;中国医科大学附属盛京医院麻醉科; |
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基金项目: | 辽宁省自然科学基金资助(2013021052) |
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摘 要: | 目的探讨高密度微团(Micromass)的细胞培养方法对人骨关节炎软骨细胞终末期成熟分化的作用影响。方法临床获取人骨关节炎关节软骨组织,分离骨关节炎软骨细胞,分别进行低密度单层培养和高密度微团培养,隔日细胞换液1次。每2日倒置显微镜观察细胞形态的变化;碱性磷酸酶(ALP)染色方法检测ALP的分泌;RT-PCT方法检测细胞内Col2、Aggrecan、ALP和MMP-13等因子mRNA的表达。结果人骨关节炎软骨细胞具有自发性向终末期成熟分化的特征,在相同时间点,Micromass培养的软骨细胞与低密度单层培养的细胞相比,更具有软骨细胞的形态特征;ALP染色显示,Micromass培养的细胞内ALP染色强度明显减弱;RT-PCT显示,Micromass培养的细胞内Col2和Aggrecan因子mRNA的表达显著提高(P0.05);ALP和MMP-13因子mRNA的表达显著降低(P0.05)。结论高密度微团培养法抑制人骨关节炎软骨细胞过快的成熟分化,更好的维持了细胞的软骨细胞表型。
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关 键 词: | 高密度 微团 人 骨关节炎 软骨细胞 |
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