| 核糖核酸酶抑制蛋白变体RIv在大肠杆菌和家蚕细胞中的表达 |
| |
| 引用本文： | 黄广华,杨冠珍,陈江野,吴祥甫.核糖核酸酶抑制蛋白变体RIv在大肠杆菌和家蚕细胞中的表达[J].生物化学与生物物理学报,2003,35(10):960-963. |
| |
| 作者姓名： | 黄广华 杨冠珍 陈江野 吴祥甫 |
| |
| 作者单位： | 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室 上海200031
(黄广华，杨冠珍，陈江野)，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室 上海200031(吴祥甫) |
| |
| 摘 要： | 人源的核糖核酸酶抑制蛋白 (ribonucleaseinhibitor,RI)是一种富含亮氨酸和半胱氨酸残基的酸性蛋白质 ,分子量为 5 0kD。从人胚胎肝cDNA文库中克隆到一个核糖核酸酶抑制蛋白RI基因的变体 (ribonucleaseinhibitorvari ant,RIv)。序列分析表明 ,与RI相比较 ,RIv序列中仅有Arg359Ala和Leu36 5Pro两个氨基酸突变 ,而核苷酸同源性较低 ,为 78%。将RIv克隆于pET2 8a( ) ,并转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,利用 6×His亲和层析柱纯化得到了His RIv重组蛋白。将RIv克隆于转移载体pBacPAK8,利用家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)表达系统表达得到重组RIv。体外活性测定实验表明 ,重组RIv具有抑制牛胰RNaseA酶解 2 8S和 18SrRNA的作用。
|
| 关 键 词： | 核糖核酸酶抑制蛋白 大肠杆菌表达 家蚕细胞表达 |
Expression of a Human Ribonuclease Inhibitor Variant in Escherichia coli and Silkworm Insect Cell ( Bombyx mori ) |
| |
| HUANG Guang-Hua,YANG Guan-Zhen,CHEN Jiang-Ye ,WU Xiang-Fu.Expression of a Human Ribonuclease Inhibitor Variant in Escherichia coli and Silkworm Insect Cell ( Bombyx mori )[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,2003,35(10):960-963. |
| |
| Authors: | HUANG Guang-Hua YANG Guan-Zhen CHEN Jiang-Ye WU Xiang-Fu |
| |
| Institution: | HUANG Guang-Hua,YANG Guan-Zhen,CHEN Jiang-Ye *,WU Xiang-Fu * |
| |
| Abstract: | Ribonuclease inhibitor (RI) is an acidic 50 kD protein with a high content of leucine and cysteine residues. RI inhibits RNases of the pancreatic type. A variant of RI was cloned from human fetal liver cDNA library by polymerase chain reaction (PCR). Compared with the reported RI, only two variations Arg 359Ala and Leu 365Pro were found in RIv amino acid sequence. Recombinant RIv has been expressed both in Escherichia coli and silkworm insect cells ( Bombyx mori ). The recombinant RIv exhibited inhibition activity on ribonucleolytic activity of RNase A in vitro system. |
| |
| Keywords: | human RNase/angiogenin inhibitor variant (RIv) expression in Escherichia coli expression in silkworm cells (Bombyx mori |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
