| 一个简便的DNA改组(DNA shuffling)操作程序 |
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| 引用本文： | 周佳海,陈海宝.一个简便的DNA改组(DNA shuffling)操作程序[J].生物化学与生物物理进展,2000,27(6):655-657. |
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| 作者姓名： | 周佳海 陈海宝 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海有机化学研究所,生命有机化学国家重点实验室,上海,200032 |
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| 基金项目： | (1986～1995)国家高技术发展计划项目，(1996～1998)国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 介绍了一个简便的DNA改组操作程序.首先利用PCR扩增了两段具有高度序列同源性的1 700 bp左右的基因片段，两者相比较同源性大于93%.然后将其等量混合后，在Mg2+存在的条件下，用DNaseⅠ切割成10～50 bp的小片段.这些小片段在不外加引物的前提下，利用PCR反应进行重聚，再将重聚物经过两轮正常的PCR扩增，获得了与原来片段大小相当的基因片段.这一技术有利于从一组序列同源性程度较高的基因库构建随机嵌合基因.
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| 关 键 词： | DNA改组，重聚 PCR，定向进化 |
| 收稿时间： | 1999/11/19 0:00:00 |
| 修稿时间： | : |
A Facile DNA Shuffling Protocol |
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| ZHOU Jia-Hai and CHEN Hai-Bao.A Facile DNA Shuffling Protocol[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2000,27(6):655-657. |
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| Authors: | ZHOU Jia-Hai and CHEN Hai-Bao |
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| Institution: | State key Laboratory of Bio-organic and Natural Products Chemistry, Shanghai Institute of Organic Chemistry, The Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China;State key Laboratory of Bio-organic and Natural Products Chemistry, Shanghai Institute of Organic Chemistry, The Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | DNA shuffling re-assembly via PCR directed evolution |
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