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苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L—苯丙 …
作者姓名:胡维  刘菊忠
作者单位:首都医科大学附属北京红十字朝阳医院基础医学研究中心
摘    要:利用基因重组技术,在大肠杆菌中克隆并表达苯丙氨酸脱氨酸(PAL)(EC4.3.1.5),并应用此酶转化肉桂酸生成L-苯丙氨酸。方法是将欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA亚克隆到组成型表达载体pMG36e启动子P32下游,以菌落PCR法鉴定插一段的大小和方向都正确的克隆,进而以HPLC检测肉桂酸浓度的方法鉴别重组质粒有催化肉桂酸生成L-苯丙氨酸的酶活力。结果获得能表达PAL酶活性的阳性克隆,在PH10,含1

关 键 词:苯丙氨酸脱氨酶  苯丙氨酸  基因表达  酶法合成
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