苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达及酶法合成L—苯丙 … |
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作者姓名: | 胡维 刘菊忠 |
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作者单位: | 首都医科大学附属北京红十字朝阳医院基础医学研究中心 |
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摘 要: | 利用基因重组技术,在大肠杆菌中克隆并表达苯丙氨酸脱氨酸(PAL)(EC4.3.1.5),并应用此酶转化肉桂酸生成L-苯丙氨酸。方法是将欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA亚克隆到组成型表达载体pMG36e启动子P32下游,以菌落PCR法鉴定插一段的大小和方向都正确的克隆,进而以HPLC检测肉桂酸浓度的方法鉴别重组质粒有催化肉桂酸生成L-苯丙氨酸的酶活力。结果获得能表达PAL酶活性的阳性克隆,在PH10,含1
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关 键 词: | 苯丙氨酸脱氨酶 苯丙氨酸 基因表达 酶法合成 |
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