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香蕉花叶病毒外壳蛋白基因克隆及表达载体的构建
引用本文:杜道林,苏杰,周鹏,刘志晰,邓晓东,郑学勤.香蕉花叶病毒外壳蛋白基因克隆及表达载体的构建[J].广西植物,2002,22(1):81-84,13.
作者姓名:杜道林  苏杰  周鹏  刘志晰  邓晓东  郑学勤
作者单位:1. 海南师范学院生物系,海南海口,571158;热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口,571101
2. 海南师范学院生物系,海南海口,571158
3. 热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口,571101
基金项目:海南省教育厅项目 (Hjsk990 9- 1),农业部生物技术重点项目,海南省重点扶持学科“生态学”,海南师范学院科研启动基金资助
摘    要:从海南大田感染香蕉花叶病的香蕉叶片 ,获得香蕉花叶病毒 ,提纯其 RNA,在 AMV反转录酶作用下合成 c DNA第一链 ,经 PCR扩增 ,获得一约 70 0 bp的 DNA片段 ,测序结果显示所克隆的 DNA片段包含一完整的香蕉花叶病毒株系 ( CMV-BHI)外壳蛋白基因 ,长度为 6 5 7bp,然后将此 DNA片段 ,分别克隆到p BI1 2 1和 p KHG4质粒 ,构成两个含 Ca MV35 s启动子 ( 5 '-端 )、NOS终止子 ( 3'-端 )和分别含 NPT 标记基因和 NPT 及 HPT标记基因的植物表达载体 ( p TBB和 p TBK)。然后用 p AHC1 8中的 UBI promoter换下p BI1 2 1的 Ca MV35 s promoter,构成 p BIAH;再用 CMV-BHI外壳蛋白基因换下 p BIAH中 GUS基因 ,构成一含单子叶植物启动子 UBI和 NPT 标记基因的植物表达载体 ( p TBBU)。从而为 CMV-BHI外壳蛋白基因在香蕉中表达打下了基础

关 键 词:香蕉花叶病毒  外壳蛋白基因  克隆  测序  植物表达载体
文章编号:1000-3142(2002)01-0081-04

Cloning and reconstruction of expression vector of the banana mosaic virus coat protein gene
DU Dao-lin ,SU Jie ,ZHOU Peng ,LIU Zhi-xin ,DEN Xiao-dong ,ZHENG Xue-qin.Cloning and reconstruction of expression vector of the banana mosaic virus coat protein gene[J].Guihaia,2002,22(1):81-84,13.
Authors:DU Dao-lin    SU Jie  ZHOU Peng  LIU Zhi-xin  DEN Xiao-dong  ZHENG Xue-qin
Institution:DU Dao-lin 1,2,SU Jie 1,ZHOU Peng 2,LIU Zhi-xin 2,DEN Xiao-dong 2,ZHENG Xue-qin 2
Abstract:
Keywords:banana mosaic virus  coat protein gene  cloning  sequencing  plant expression vector
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