华癸中生根瘤茵7653R共生质粒pMH7653Rb的不相容性行为

摘要华癸中生根瘤菌菌株7653R含有2个内源质粒（pMH7653Ra，pMH7653Rb）．用三亲本杂交法将7653R的共生质粒pMH7653Rb分别导入HN308SR（Sm^r，Rif^r；含pMHHN308a，pMHHN308b和pMHHN308c）和HN3015SR（Sm^r，Rif^r；含pMHHN3015a，pMHHN3015b和pMHHN3015c）．发现受体菌HN308SR的两个稳定内源质粒pMHHN308b和pMHHN308c随着pMH7653Rb的导入而同时被消除．该接合子命名为HN308SRN14．这一结果表明pMH7653Rb与pMHHN308b和pMHHN308c不相容，可以归于同一不相容群．另一转移接合子HN3015SRN14的质粒图谱显示其第二大质粒pMHHN3015b由于pMH7653Rb的导入而被消除．该结果表明，pMH7653Rb与pMHHN3015b不相容．植物结瘤实验结果表明，pMH7653Rb的导入能恢复HN308SRN14的结瘤能力，其结瘤数目超过HN308SR，但不能替代pMHHN308b和pMHHN308c的固氮作用，HN308SRN14失去了固氮能力．质粒消除突变株HN308SRNl4D只含有pMHHN308a，能形成少量无效根瘤，确认pMHHN308a与HN308的结瘤能力有关．HN3015SRN14（含pMH7653Rb，pMHHN3015a和pMHHN3015c）只能形成无效根瘤，而质粒消除突变株HN3015SRN14D（仅含pMHHN3015a和pMHHN3015c）则完全失去结瘤能力．通过PCR反应从7653R，HN308，HN3015，HN308SRN14，HN3015SRN14中均检测到质粒复制基因repC．供试菌株的repC基因序列相似性达到99％．