| 玻璃表面cDNA微阵列的制备与优化 |
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| 引用本文： | 谢文章,孙宝全,马清梅,程京. 玻璃表面cDNA微阵列的制备与优化[J]. 生物物理学报, 2002, 18(1): 76-80 |
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| 作者姓名： | 谢文章 孙宝全 马清梅 程京 |
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| 作者单位： | 1. 清华大学生物科学与技术系,北京,100084;清华大学生物芯片北京国家工程研究中心,北京,100084
2. 清华大学化学系,北京,100084;清华大学生物芯片北京国家工程研究中心,北京,100084 |
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| 摘 要： | 对DNA进行荧光标记，确定简单、实用和有效的固定化方法和筛选出合适的杂交条件，是制备DNA阵列的几个关键步骤。在PCR的过程对cDNA进行标记，不同的掺入比例可以得到不同的标记效率，Cye dye-dCTP/dCTP的比例在1：3－1：4较好。将DNA固定到玻璃表面，poly-1-lysine方法是一种不需要对DNA进行修饰的有效方法，其中UV照射的能量以600mJ效果最好；水合（rehydrate）温浴过程的温度以65℃最佳，在固化过程中所用探针的浓度0.2-0.5mg/ml对杂交信号影响不多，也就是芯片表面固定的探讨DNA应选在此范围内，杂交信号与所用的靶DNA的浓度成正相关，且有一定的范围内呈正比例关系。
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| 关 键 词： | 玻璃表面 cDNA微阵列 制备 优化 DNA芯片 固定化 荧光标记 UV交联 杂交 |
| 文章编号： | 1000-6737(2002)01-0076-05 |
| 修稿时间： | 2001-03-21 |
THE FABRICATION AND OPTIMIZATION OF cDNA ARRAYS ON THE GLASS SURFACE |
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| XIE Wen-zhang,,SUN Bao-quan,,Ma Qing-mei,,CHENG Jing. THE FABRICATION AND OPTIMIZATION OF cDNA ARRAYS ON THE GLASS SURFACE[J]. Acta Biophysica Sinica, 2002, 18(1): 76-80 |
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| Authors: | XIE Wen-zhang SUN Bao-quan Ma Qing-mei CHENG Jing |
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| Affiliation: | XIE Wen-zhang1,3,SUN Bao-quan2,3,Ma Qing-mei1,3,CHENG Jing1,3 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | DNA chip UV crosslinking Fluorescence labeling Immobilization Hybridization |
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