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噬菌体展示系统表达玉米赤霉烯酮模拟表位肽
引用本文:徐富勇,徐玲,刘仁荣,裘雪梅,朱立鑫.噬菌体展示系统表达玉米赤霉烯酮模拟表位肽[J].生物技术通报,2013(1):144-150.
作者姓名:徐富勇  徐玲  刘仁荣  裘雪梅  朱立鑫
作者单位:南昌大学生命科学与食品工程学院;江西科技师范大学生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金项目(30860240);江西省自然科学基金项目(2010GZN0022)
摘    要:拟用pⅧ噬菌体展示系统表达玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)模拟表位肽,并验证其反应原性。通过将含有ZEN模拟表位序列以及肠激酶酶切位点的寡聚核苷酸与经过EcoR I和BamH I双酶切的pC89S4噬菌粒连接,构建表达载体pC89-CZEN。pC89-CZEN转化感受态XL1-Blue得到工程菌pC89-ek-zen,然后用KM13超感染、IPTG诱导表达,纯化后得到展示有玉米赤霉烯酮模拟表位的噬菌体颗粒。对KM13超感染时菌体浓度OD600、IPTG诱导时菌体浓度OD600、IPTG加入量以及诱导表达温度和时间进行优化,以探索最佳表达条件;通过ELISA测定反应原性,对比肠激酶酶切前后模拟表位肽与ZEN抗体的结合效果。结果显示,成功构建了表达载体pC89-CZEN,最优表达条件为KM13超感染时菌体浓度OD600为0.4、IPTG诱导时菌体浓度OD600为0.6以及IPTG加入量为终浓度1.0 mmol/L、诱导表达温度为24℃、时间8 h,酶切后结合效果明显高于酶切前。

关 键 词:噬菌体展示系统  玉米赤霉烯酮  模拟表位  肠激酶

Expression of Zearalenone Mimicking Epitope Peptide by Phage Display System
Xu Fuyong,Xu Ling,Liu Renrong,Qiu Xuemei,Zhu Lixin.Expression of Zearalenone Mimicking Epitope Peptide by Phage Display System[J].Biotechnology Bulletin,2013(1):144-150.
Authors:Xu Fuyong  Xu Ling  Liu Renrong  Qiu Xuemei  Zhu Lixin
Institution:1.School of Life Sciences and Food Engineering,Nanchang University,Nanchang 330029;2.School of Life Science,Jiangxi Science & Technology Normal University,Nanchang 330013)
Abstract:
Keywords:
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